表达红荧光蛋白的重组痘苗病毒的包装与鉴定

沈百庆, 程乾, 罗砚曦, 阎辉, 郑骏年

徐州医科大学学报 ›› 2015, Vol. 35 ›› Issue (05) : 286-290.

表达红荧光蛋白的重组痘苗病毒的包装与鉴定

  • 沈百庆, 程乾, 罗砚曦, 阎辉, 郑骏年
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摘要

目的 包装并鉴定表达红荧光蛋白(RFP)基因的重组痘苗病毒(VV-RFP)。方法 以质粒pDsRed-express-C1为模板,PCR扩增出RFP基因,并克隆至痘苗病毒转移载体pCB中,经酶切分析和DNA测序鉴定正确,得到阳性重组质粒pCB-RFP。将该重组质粒用脂质体转染293细胞后再用野生型痘苗病毒感染,通过同源重组获得重组痘苗病毒,利用RFP和gpt抗性标志筛选和噬斑纯化获得重组痘苗病毒VV-RFP。结果 成功包装出表达RFP基因的重组痘苗病毒。结论 包装的VV-RFP为进一步构建携带特定治疗基因的重组痘苗病毒奠定了基础。

关键词

红荧光蛋白 / 痘苗病毒 / 同源重组

中图分类号

R392-33

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沈百庆, 程乾, 罗砚曦, 阎辉, 郑骏年. 表达红荧光蛋白的重组痘苗病毒的包装与鉴定. 徐州医科大学学报. 2015, 35(05): 286-290

基金

国家自然科学基金面上项目(81172137); 江苏省高校自然科学基金面上项目(13KJB320028); 江苏省肿瘤生物治疗协同创新项目

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