人端粒酶逆转录酶基因RNAi表达载体的构建、鉴定

徐州医科大学学报 ›› 2006, Vol. 0 ›› Issue (01) : 37-39.

毛立军, 郑骏年, 李望, 郑宏祥, 刘俊杰, 孙晓青, 陈家存, 温儒民

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摘要

目的构建端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体。方法化学合成能编码针对hTERT基因的短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸,退火处理后克隆到pSilencer1.0-U6 shRNA表达载体的U6RNA聚合酶Ⅲ(PolⅢ)启动子的下游,构建重组RNAi质粒pSliencer-hTERT。结果经酶切电泳及测序分析证实,目的序列成功插入到预计位点。结论已成功构建pSliencer-hTERT载体,为进一步研究其对端粒酶活性的抑制作用打下基础。