目的 建立基于液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）的激素测定平台，并与化学发光免疫分析（chemiluminescence immunoassay,CLIA）测定的血清睾酮（T）、硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）、孕酮（P4）和雌二醇（E2）水平进行对比，明确该LC-MS/MS平台诊断高雄激素血症和多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）的临床价值。方法 纳入PCOS患者35例（PCOS组），正常对照组33例，LC-MS/MS测定血清T、雄烯二酮（A4）、DHEA-S、双氢睾酮（DHT）、脱氢表雄酮（DHEA）、P4、E2、雌酮（E1）、雌三醇（E3）、17-羟孕酮（17-OHP）、皮质醇和可的松水平，并与CLIA测定的血清T、DHEA-S、P4和E2水平进行比较，ROC曲线分析LC-MS/MS测定的血清T、A4和E1水平诊断PCOS的曲线下面积、灵敏度、特异度和约登指数、阳性预测值和阴性预测值。结果 LC-MS/MS测定的血清T、DHEA-S、P4和E2水平均低于CLIA，差异有统计学意义（P <0.05）。LC-MS/MS联合检测T、A4、DHEA-S、DHT和DHEA可以提高高雄激素血症的检出率（P <0.05）。PCOS患者的血清T、A4和E1水平均高于正常对照组，差异有统计学意义（P <0.05）,ROC曲线亦提示LC-MS/MS测定血清T、A4和E1水平诊断PCOS有临床价值（P <0.05）。结论 LC-MS/MS激素测定平台检测多项雄激素能提高高雄激素血症的检出率，较CLIA能更好的识别PCOS患者。