肠道微生物和宿主免疫系统之间相互作用的紊乱会引发慢性炎症，例如炎症性肠病(IBD),包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)。研究表明IBD宿主肠道微生物可以直接或间接地影响免疫系统稳态，而促炎和抗炎细胞因子之间的平衡又能参与维持健康的微生物群落并加强肠上皮屏障功能。IBD中肠道微生物与白细胞介素10(IL-10)、 IL-17、 IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的相互作用对于了解IBD的发病机制具有特别重要的意义。

目的 探索白细胞介素1β(IL-1β)在急性痛风性关节炎(AGA)的关节损伤过程中与miR-185-5p的关系。方法 采用实时荧光定量PCR检测89名AGA患者及91名健康志愿者的血清miR-185-5p的水平，采用Pearson相关系数法评估miR-185-5p的表达水平与视觉模拟(VAS)评分以及IL-1β水平之间的相关性；采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-185-5p对AGA的诊断价值。采用尿酸钠(MSU)诱导THP-1细胞建立体外急性痛风性炎症细胞模型，通过体外转染miR-185-5p模拟物或抑制物增加或降低THP-1细胞miR-185-5p的表达水平后，采用ELISA检测THP-1细胞白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-8及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平；荧光素酶报告基因实验确定miR-185-5p与IL-1β的3′-非翻译区(3′-UTR)的相互作用。结果 与健康对照组相比，AGA患者血清miR-185-5p的水平显著降低；血清miR-185-5p的水平与VAS评分和IL-1β的表达水平均呈负相关；ROC曲线下面积为0.905,敏感性为80.17%,特异性为83.52%。下调miR-185-5p显著促进THP-1细胞IL-1β、 IL-8及TNF-α的表达，而过表达miR-185-5p则呈现相反的结果；荧光素酶报告基因实验显示IL-1β是miR-185-5p的靶基因，并且负调控IL-1β的表达。结论 miR-185-5p通过靶向抑制IL-1β减轻AGA的炎症反应。

宫颈癌是全球女性常见癌症之一，高危型人乳头瘤病毒16(HPV16)、 HPV18的长期感染是宫颈癌的主要病因，目前广泛应用的HPV疫苗主要有2价Cervarix疫苗、 4价Gardasil疫苗及9价Gardasil-9疫苗，三种疫苗接种后在T细胞效应分子变化，B细胞产生的抗体水平、持续时间、年龄及接种针剂等方面存在差异。

巨噬细胞具有强大的铁处理能力，在机体铁代谢调控中发挥重要作用，不同功能亚型巨噬细胞的铁代谢过程明显不同，反之铁代谢亦可以调控巨噬细胞功能状态。当巨噬细胞内铁离子超载时，可通过一系列信号通路启动细胞铁死亡程序。巨噬细胞铁死亡可加重局部炎症反应，促进代谢、感染、炎症等多种疾病的进展，因此抑制巨噬细胞铁死亡可能是重要的治疗靶点；在恶性肿瘤中，抑制M1样巨噬细胞铁死亡和促进M2样巨噬细胞铁死亡对抑制肿瘤进展具有重要意义。

固有免疫中的核苷酸结合寡聚结构域样受体(NLR)家族对免疫功能的发挥起着至关重要的作用。含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、核苷酸结合寡聚结构域样受体X1(NLRX1)和含CRAD结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRC3)是NLR家族中的关键成员，它们与免疫代谢之间的关联成为研究的新焦点。NLRP3的激活可促进炎性小体的组装，导致白细胞介素1β(IL-1β)的激活，进而引发炎症反应。NLRC3则能抑制核因子κB(NF-κB)和干扰素基因刺激物/TANK结合激酶1(STING/TBK1)信号通路的激活，以及炎性小体的形成，进而调控免疫反应。而NLRX1则通过调节Ⅰ型干扰素、 NF-κB信号传导以及自噬等过程，对免疫应答进行精细调控。这些NLR成员不仅参与病原体的识别，更与免疫代谢的调控密切相关。对NLR家族的深入研究将有助于揭示免疫代谢的奥秘，为疾病的治疗提供新的思路。

目的 探究高迁移率族核小体结合蛋白1(HMGN1)对小鼠BV2细胞炎症反应的影响并探究其可能的机制。方法使用(0、 100、 200、 500、 1000、 2000)ng/mL的重组HMGN1孵育BV2细胞6 h。用显微镜观察细胞形态变化，实时定量PCR检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) mRNA水平。随后把小胶质细胞随机分成对照组、模型组、抑制剂组和拮抗剂组。模型组用500 ng/mL的HMGN1处理BV2细胞，拮抗剂组在模型组的基础上加入瑞沙托维(resatorvid)/TAK-242进行干预，使用实时定量PCR和免疫荧光细胞化学染色检测细胞中的M1/M2型标志物的表达情况，Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、 Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)和NF-κB抑制物激酶β(IKK-β)的蛋白表达。结果 HMGN1处理后，BV2细胞形态发生明显变化，呈阿米巴样；与0 ng/mL HMGN1组相比，TNF-α、 IL-6、 IL-1β、 MCP-1的mRNA水平随HMGN1剂量的增加而升高；M1型标志物iNOS的mRNA水平随HMGN1剂量的增加而升高，M2型标志物CD206的水平随HMGN1剂量的升高而降低。与模型组相比，拮抗剂组M1型标志物iNOS的mRNA水平显著降低，M2型标志物CD206的水平显著升高。免疫荧光细胞化学染色结果也显示MI型标志物iNOS在拮抗剂组中的表达降低。Western blot的结果提示，拮抗剂组iNOS、 TLR4、 MyD88、 NF-κB p65和IKK-β的蛋白表达显著降低。结论 HMGN1可能通过激活TLR4/MyD88/NF-κB p65/IKK-β信号通路诱导BV2小胶质细胞活化来上调其促炎介质的水平。

目的 探讨环状RNA Cbl原癌基因B(circCBLB)/miR-486-5p功能轴对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及炎症因子产生的影响。方法 人RA-FLS,用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。采用双荧光素酶靶向验证circCBLB/miR-486-5p的结合关系。构建pcDNA3.1/siRNA-circCBLB、阴性对照(pcDNA3.1-NC/si-NC)和mimics-miR-486-5p,分别转染至RA-FLS。实验分为对照组、 TNF-α处理的RA-FLS、 pcDNA3.1-circCBLB组、 pcDNA3.1-NC组、 si-circCBLB组、 si-NC组、 pcDNA3.1-circCBLB联合miR-486-5p-mimics组。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡，平板集落形成实验检测细胞平板集落形成能力，实时定量PCR检测各组circCBLB、 miR-486-5p表达水平，ELISA检测各组细胞上清液抗炎因子白细胞介素4(IL-4)、 IL-10,促炎因子IL-6、 TNF-α水平。结果 双荧光素酶报告基因结果示circCBLB与miR-486-5p的3′非翻译区(3′UTR)结合；与同一时间点模型组细胞相比，过表达组细胞活力降低，干扰组升高；与模型组相比，过表达组凋亡率升高、 S和G2期的比例升高、集落形成率降低、 miR-486-5p表达水平降低、 IL-4、 IL-10水平升高，IL-6、 TNF-α水平降低；干扰组凋亡率降低、 S和G2期的比例降低、集落形成率升高、 miR-486-5p表达水平升高、 TNF-α水平升高；pcDNA3.1-circCBLB联合miR-486-5p-mimics组在circCBLB过表达的基础上，在细胞活力、细胞凋亡率、细胞周期、集落形成能力、抗炎因子的提高、促炎因子的降低方面对circCBLB的效应产生了抵消与逆转。结论 circCBLB抑制RA-FLS活力、提高细胞凋亡率、延长细胞周期降低细胞集落能力、提高抗炎因子，降低促炎因子，miR-486-5p则与circCBLB调控能力相反，且对circCBLB的效应具有一定的抵消与逆转能力。

目的 观察恩格列净(EM)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾损伤的治疗效果，并探讨其可能存在的机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为正常对照(NC)组、 T2DM组和EM组，每组6只。T2DM组和EM组，给予腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM模型，记录各组大鼠空腹血糖(FBG)和体质量。EM组给予EM溶液灌胃，其余两组予以等量的羧甲基纤维素钠溶液灌胃，给药12周。记录大鼠体质量和FBG后处死大鼠，留存腹主动脉血液和肾脏组织。全自动生化分析仪检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);行Masson染色、过碘酸希夫(PAS)染色、 HE染色观察肾脏组织学变化，透射电镜观察肾脏超微结构变化；免疫组织化学染色法检测大鼠肾脏组织中环磷酸腺苷直接激活的交换蛋白1(Epac1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)的表达和分布。结果 与NC组相比，T2DM组大鼠体质量下降，FBG、 Scr、 BUN、 UA、 TC、 TG水平明显升高；肾小球基底膜增厚，足细胞足突融合，排列紊乱，内皮细胞窗孔消失；Epac1蛋白表达水平下降，TNF-α、 IL-1β、 IL-18的蛋白表达水平明显增高。与T2DM组相比，EM组大鼠体质量上升，FBG、 Scr、 BUN、 UA、 TC、 TG水平降低；肾损伤减轻，Epac1蛋白表达水平升高，TNF-α、 IL-1β、 IL-18的表达显著降低。结论 EM能够改善T2DM肾损伤。这种治疗效果是通过上调Epac1蛋白表达，抑制炎症反应介导的。

白细胞介素38(IL-38)作为IL-1家族中的一种新型细胞因子，在机体中广泛表达，具有重要免疫调节功能。IL-38既能够通过抑制IL-36受体(IL-36R)表达进而阻遏其下游的核因子κB(NF-κB)通路，抑制小胶质细胞激活，减少促炎细胞因子的产生；还能通过干扰含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)的组装和活性来调控巨噬细胞极化。此外，IL-38还具有调控血管内皮生长因子(VEGF)功能，对于缺血性脑卒中损伤血管的清除发挥重要作用。本文总结了IL-38在不同中枢神经疾病中的作用机制。

目的 探索铁过载对小鼠脾脏损伤的影响及线粒体内膜蛋白17（MPV17）在铁过载小鼠脾脏CD3⁺ T细胞铁死亡中的作用。方法 将小鼠随机分为正常饮食组、高铁饮食组、高铁饮食联合铁死亡抑制剂ferrostatin-1（Fer-1）处理组、高铁饮食联合MPV17腺病毒注射组，每组5只。喂食8周后，取脾脏组织并固定，通过组织切片和HE染色法观察脾脏结构，碘化丙啶（PI）染色检测脾脏CD3⁺ T细胞死亡，脂质过氧化荧光探针C11 BODIPY 581/591检测脂质氧化，实时定量PCR检测溶质载体家族7成员11（SLC7A11）及前列腺素内过氧化物合成酶2（PTGS2） mRNA水平，流式细胞术检测M1、 M2巨噬细胞比例，ELISA实验检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）及IL-6的含量。同时增加高铁饮食联合细胞外信号调节激酶（ERK）抑制剂处理组、 ERK激活剂处理组、 β半乳糖苷（β-gal）酶联合ERK激活剂处理组、 MPV17联合ERK激活剂处理组，Western blot法检测MPV17、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、磷酸化的ERK（p-ERK）水平，JC-1结合流式细胞术检测线粒体膜电位。结果与正常饮食组相比，高铁饮食组小鼠脾脏红髓形状不规则，白髓结构消失，脾脏CD3⁺ T细胞死亡增多，脂质过氧化物增多，SLC7A11及PTGS2表达升高，血液中M1/M2巨噬细胞比例升高，炎症因子含量升高；经Fer-1处理或过表达MPV17,部分恢复脾脏结构，CD3⁺ T细胞数量及脂质过氧化物减少，SLC7A11及PTGS2表达被抑制，M1/M2巨噬细胞比例及炎症因子的含量降低。高铁饮食导致GPX4表达降低，p-ERK表达升高，抑制ERK部分恢复GPX4表达，激活ERK降低GPX4表达；MPV17抑制ERK部分恢复GPX4表达，MPV17部分恢复因ERK激活导致的线粒体膜电势降低。结论 铁过载可诱导小鼠脾脏CD3⁺ T细胞发生铁死亡，MPV17通过阻断ERK信号抑制高铁饮食诱导的脾脏CD3⁺ T细胞铁死亡。

宫颈癌(CC)因其高发病率高死亡率，一直是妇科癌症领域里的热点。作为主要组成成分之一，肿瘤相关巨噬细胞(TAM)在肿瘤微环境(TME)中有着十分重要的作用。TAM可经过不同的细胞因子介导分化为M1型以及M2型，而通常所说的TAM大多属于M2型。值得注意的是，两者的作用效果几乎相反，M1型巨噬细胞通常促进炎症反应且抑制肿瘤发生发展，而M2型巨噬细胞更倾向于抑制免疫反应和促进肿瘤进展。同时，TAM可通过与体内多种淋巴细胞和细胞因子相互作用从而影响肿瘤的侵袭转移和免疫调节。多项研究证明TAM可作为CC的预后指标，在临床上TAM也可以作为CC的治疗靶点。综合多方面的研究数据与结论，更全面的认识TAM与CC的相互作用，有利于发现研究新方向，提出临床治疗新展望。

目的 基于多种生物信息学数据库和免疫组织化学染色分析吲哚胺2, 3-双加氧酶1(IDO-1)在食管癌中的表达及临床意义。方法 通过免疫组织化学染色法检测IDO-1在食管癌组织和癌旁组织的表达水平，利用肿瘤免疫评估资源数据库(TIMER)、基因表达谱交互分析数据库(GEPIA)、阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析数据库(UALCAN)、 Kaplan-Meier plotter、癌症基因组图谱数据库(TCGA)等数据库分析IDO-1在食管癌组织中的表达情况，IDO-1差异表达对食管癌患者预后的影响，IDO-1表达与肿瘤特征基因通路的相关性，IDO-1表达与免疫细胞浸润情况及免疫检查点表达情况的相关性。结果 免疫组织化学染色结果显示，IDO-1在食管癌组织中的阳性表达率为70%,明显高于癌旁组织的15%;IDO-1表达与患者年龄、性别无显著差异。IDO-1表达在低分化食管癌组织、高临床分期级有淋巴结转移的组织表达增加；GEPIA数据库和TIMER数据库分析结果显示，IDO-1在食管癌组织中表达水平显著高于癌旁组织；UALCAN数据库分析结果显示，IDO-1在低分化食管癌、有淋巴结转移的患者高表达；GEPIA数据库、 Kaplan-Meier plotter数据库、 UALCAN数据库分析结果显示，IDO-1高表达的食管癌患者，特别是食管鳞状细胞癌患者的生存时间显著缩短，但食管腺癌患者的IDO-1表达水平与生存时间并无显著相关性；TCGA数据库食管癌RNA-seq数据的通路富集、免疫细胞浸润、免疫检查点表达情况分析结果显示食管癌患者IDO-1的表达水平与多种食管癌恶性进展基因通路密切相关，并且IDO-1表达与多种免疫细胞浸润和免疫检查点表达关系密切。结论 IDO-1在食管癌中高表达并与患者不良预后密切相关，高表达IDO-1是食管癌恶性进展及免疫抑制微环境形成的关键因素。

目的 研究线粒体转录因子A（TFAM）对宫颈癌HeLa细胞及骨肉瘤U2OS细胞的线粒体功能、自噬、增殖、侵袭、迁移的影响。方法 HeLa、 U2OS细胞转染TFAM小干扰片段（si-TFAM）下调TFAM表达，Mito-Tracker Red CMXRos染色结合激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位（MMP）、 MitoSOX^TM Red标记法检测线粒体活性氧（mtROS）水平、实时定量PCR检测线粒体DNA（mtDNA）的表达，免疫荧光细胞化学染色检测自噬体数量的变化。Western blot法检测TFAM、微管相关蛋白1轻链3A/B（LC3A/B）、自噬相关基因2A（ATG2A）、 ATG2B、 ATG9A、锌指转录因子Snail、基质金属蛋白酶2（MMP2）和MMP9的表达。CCK-8法、平板集落形成实验检测细胞增殖，Transwell^TM实验、划痕愈合实验检测细胞侵袭、迁移的变化。结果 下调TFAM表达导致HeLa及U2OS细胞MMP减少，mtDNA拷贝数减少，mtROS产生量增加。LC3A/B蛋白含量较对照组明显下降，胞质内自噬体数量明显减少，自噬早期阶段蛋白ATG2B、 ATG9A表达量明显减少。HeLa及U2OS细胞Snail、 MMP2和MMP9蛋白表达均减少。干扰TFAM表达，抑制HeLa及U2OS细胞的增殖、侵袭、迁移能力。结论 下调TFAM表达抑制线粒体功能，延缓自噬进程，降低宫颈癌细胞及骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力。

目的 确定汉滩病毒(HTNV)可感染BEAS-2B正常人肺上皮细胞并通过转录组分析HTNV感染诱导的宿主免疫应答和代谢改变。方法 采用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR和免疫荧光实验检测BEAS-2B细胞内的病毒载量，并使用RNA测序技术进行转录组分析。结果 在HTNV感染的BEAS-2B细胞中，HTNV核衣壳蛋白(NP)和小片段(S)表达均随时间增加。对HTNV感染BEAS-2B细胞48 h的转录组数据分析，得到328个差异基因，基因本体论(GO)富集及京东基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析发现其差异主要集中在干扰素应答及固有免疫模式识别受体相关通路。通过蛋白质互作网络分析发现多个固有免疫应答相关基因，此外筛选到4个编码去整合素和具有血小板反应蛋白基序的金属蛋白酶的基因。通过对代谢通路分析发现3个与萜类骨架生物合成相关的基因，2个与糖酵解/糖异生相关基因和2个类固醇激素生物合成相关基因。此外，差异基因的亚细胞定位分析表明多个差异基因位于线粒体。结论 HTNV能有效感染BEAS-2B细胞，可作为体外HTNV感染人肺上皮的细胞模型。生物信息学方法筛选的HTNV感染相关的差异基因及代谢通路，可为研究HTNV感染的分子机制提供理论依据。

目的 探讨天然植物化合物樱黄素(PRU)对肠上皮细胞炎症和屏障结构的作用及其对小鼠克罗恩病样结肠炎的影响。方法 建立脂多糖(LPS)诱导的结肠类器官炎症损伤模型和2,4,6-三硝基苯磺酸溶液(TNBS)诱导的小鼠结肠炎模型，用于评估PRU对肠上皮炎症反应和肠屏障的影响。另外，使用网络药理学结合体内外研究分析PRU调控肠上皮炎症影响肠炎的分子机制。结果 PRU干预可抑制LPS诱导的结肠类器官中促炎介质肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β的释放以及改善TNBS诱导的小鼠结肠炎症状(体质量下降、疾病活动指数和炎症评分升高);同时，PRU促进LPS诱导的小鼠结肠类器官TNBS小鼠肠上皮细胞间紧密连接蛋白闭锁小带蛋白1(ZO-1),密封蛋白1(claudin-1)的表达和改善移位，同时保护肠屏障结构。PRU可靶向结合Toll样受体4(TLR4)并抑制TLR4/髓样分化因子88(MyD88)信号通路活化。结论 PRU可通过靶向拮抗TLR4/MyD88信号的激活，抑制肠上皮细胞炎症和保护肠屏障损伤从而改善克罗病样肠炎。

目的 本研究旨在探讨组蛋白3的27位赖氨酸(H3K27)乙酰化修饰对长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5-反义RNA1(lncRNA OIP5-AS1)转录的促进作用，探讨其通过调控Toll样受体4(TLR4)对过敏性鼻炎(AR)中鼻黏膜上皮细胞(NEC)凋亡的影响。方法 白细胞介素13(IL-13)处理NEC以建立AR细胞模型。采用实时定量PCR检测OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和体外细胞模型中的表达。ELISA检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、嗜酸性粒细胞趋化因子1(eotaxin-1)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的浓度。原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法用于检测NEC的凋亡。双荧光素酶报告实验用于验证OIP5-AS1和TLR4的关系。染色质免疫沉淀(ChIP)实验分析用于验证OIP5-AS1启动子区组蛋白的H3K27乙酰化修饰。结果 与健康对照和未处理的NEC相比，OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和IL-13刺激的NEC中均表达升高。敲减OIP5-AS1可降低IL-13诱导的NEC的TLR4水平，而过表达OIP5-AS1可增加IL-13处理的NEC的TLR4水平。敲减OIP5-AS1可降低IL-13处理的NEC凋亡率及GM-CSF、 eotaxin-1和MUC5AC的分泌，而过表达TLR4可部分逆转敲减OIP5-AS1对NEC凋亡及GM-CSF、 eotaxin-1和MUC5AC表达的影响。此外，H3K27ac在OIP5-AS1的启动子区域显著富集，H3K27乙酰化可促进OIP5-AS1在IL-13诱导的NEC中的表达。结论 H3K27乙酰化修饰促进OIP5-AS1转录并通过上调TLR4诱导AR中NEC凋亡。

目的 研究妊娠对血小板抗体阳性率及其特异性的影响。方法 随机选取215名无输血史的孕产妇，采用固相凝集法对其进行血小板抗体筛选，并对结果阳性者进行抗体特异性鉴定。结果 孕产妇血小板抗体产生率为8.84%,其中妊娠1次组(2.83%)与妊娠2次组(13.85%)及妊娠≥3次组(15.91%)相比，孕产妇血小板抗体产生率明显增加；与O型孕妇相比，A型孕妇血小板抗体阳性率明显升高。血小板抗体的产生与妊娠年龄无关。孕妇的血小板抗体中，人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)类抗体占比83.3%,HLA-Ⅰ和人血小板抗原5b(HPA-5b)抗体占比5.6%,HPA-5b抗体占比11.1%。结论 妊娠次数及孕产妇血型与血小板抗体的产生密切相关，孕产妇血小板特异性抗体以抗HPA-5b为主。应对有多次孕产史或异常分娩史的孕产妇，尤其是A型孕产妇进行血小板抗体的监测。

目的 探索细胞间充质上皮转化因子(c-Met)作为嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗结肠癌有效靶点的可能性。方法 通过生物信息学方法分析c-Met在结肠腺癌(COAD)中的特异性表达及其临床意义；使用免疫组织化学验证结肠癌临床患者肿瘤组织中c-Met的表达，采用流式细胞术检测HCT116结肠癌细胞株中c-Met的表达；使用慢病毒感染人外周血单个核细胞(PBMC)中原代T细胞，制备靶向c-Met的二代CAR-T细胞，并观察c-Met CAR-T细胞对HCT116细胞的抑制效果。结果免疫组织化学与生物信息学显示c-Met在COAD中高表达，其中相对低表达的患者生存预后较好，在正常结肠组织中低表达或不表达。流式细胞术显示c-Met在HCT116细胞中也高表达。c-Met CAR-T细胞能够靶向表达抗原的肿瘤细胞，并且在抗原刺激下，CAR-T细胞特异性增殖，起到杀伤癌细胞与释放白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的生物学作用。结论 c-Met有成为COAD潜在治疗靶点的潜能；c-Met CAR-T细胞在体外对结肠癌细胞具有抑制作用。

目的 分析输血前检测中Rh血型抗C抗体的鉴定结果及其临床意义。方法 对微柱凝胶法(MGT)鉴定ABO血型正反定型不相符的15例患者血标本，采用试管盐水法(NS)进行对比检测，并对患者红细胞进行直接抗人球蛋白试验(DAT),以排除可能存在的自身抗体对检测结果造成干扰。采用MGT和间接抗人球蛋白试验(IAT)对患者血清标本进行不规则抗体筛选、抗体特异性鉴定及交叉配血试验，采用吸收放散试验对谱细胞抗体特异性鉴定结果的准确性进行验证。结果 Rh血型抗C抗体阳性的15例患者中，RhD抗原均为阳性，RhC抗原阳性1例，RhC抗原阴性14例。抗体类型IgG型，抗体效价为4～16。患者DAT阳性2例，DAT阴性13例。7例有输血史，8例有妊娠史(其中5例还有输血史)。结论 大量反复输血和妊娠是产生免疫性不规则抗体的主要因素，对患者和孕妇进行血型及抗体鉴定，是保证输血安全和妇幼健康的重要措施。

目的 分析RhDC、 RhEc抗原阴性患者血清中存在IgG型抗DC及抗Ec联合抗体的血型血清学特点及临床意义。方法 回顾性分析12例血清中存在两种Rh系统不规则抗体的病例的临床资料及实验室检查结果，包括年龄、性别、输血史/妊娠史及血型血清学检测结果(ABO、 RhD血型鉴定及Rh分型结果、不规则抗体筛选、抗体特异性鉴定、吸收放散试验、抗体效价测定、交叉配血试验)。结果 12例患者中，年龄(51.4±16.9)岁。9例有输血史，8例有妊娠史，5例既有输血史又有妊娠史。在血型血清学检测中抗体筛选阳性、交叉配血不合。抗体特异性鉴定及吸收放散试验结果显示，3例患者血清中同时存在IgG型抗D、抗C抗体，抗D效价16～32、抗C效价8～16; 9例患者血清中同时存在IgG型抗E、抗c抗体，抗E、抗c效价均为8～16;抗D、抗C联合抗体的患者选择ABO同型RhD阴性，其他Rh抗原为ccee的悬浮红细胞，抗E、抗c联合抗体的患者选择ABO同型RhD阳性，其他Rh抗原为CCee的悬浮红细胞，交叉配血试验结果显示，在盐水、聚凝胺、抗人球蛋白介质中均无凝集、无溶血。结论 输血和(或)妊娠免疫是产生两种Rh系统不规则抗体、导致抗体筛选阳性及交叉配血不合的主要原因，ABO同型基础上常规进行Rh配合性输注，对于临床输血的安全性和预防新生儿溶血病的发生具有重要的价值和意义。

目的 探究苦豆碱(Alo)对香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法 16HBE人支气管上皮细胞经100 mL/L香烟烟雾提取物(CSE)和(50、 100、 200)μmol/L Alo共处理后，CCK-8法检测细胞活力，试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)活性；原位末端转移酶标记技术(TUNEL)、 Western blot法检测细胞凋亡，ELISA检测炎性因子水平；2′, 7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针和相关试剂盒检测氧化应激水平；Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达水平。16HBE细胞经100 mL/L CSE和200μmol/L Alo共处理后，采用上述方法检测过表达TLR4对TLR4/NF-κB/NLRP3通路、细胞LDH活性、凋亡、炎症反应及氧化应激的影响。结果 CSE暴露可降低16HBE细胞活力，增加LDH释放和细胞凋亡，增强炎症反应和氧化应激水平，且激活TLR4/NF-κB/NLRP3通路；经Alo处理后，细胞活性升高，LDH释放减少、凋亡降低、炎症减轻、氧化应激水平下降，且TLR4/NF-κB/NLRP3通路失活；TLR4过表达可逆转Alo处理对CSE诱导的16HBE细胞损伤的保护作用。结论Alo可通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路减轻CSE诱导的人支气管上皮细胞损伤。

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者血清中细胞因子的含量，探讨炎性相关细胞因子联合检测对RA病情程度评估的临床应用价值。方法 募集RA患者28例和同期15例健康体检者。多重微球流式免疫荧光发光法检测白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-2、 IL-5、 IL-6、 IL-8、 IL-12P70、 IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 α干扰素(IFN-α)、 IFN-γ、 IL-4、 IL-10炎症相关细胞因子表达情况，全自动生化分析仪检测C反应蛋白(CRP),魏氏法测量红细胞沉降率(ESR),获取炎症指标数据。计算RA组患者28关节疾病活动指数(DAS28),比较各细胞因子与RA疾病活动度的曲线下面积，分析RA患者炎症相关细胞因子血清水平与CRP、 ESR的相关性。结果 RA患者血清中IL-2、 IL-6、 IL-12P70、 IL-4、 IL-10与RA疾病活动度的指标DAS28-CRP显著相关，IL-12P70、 TNF-α、 IL-4与RA疾病活动度的指标DAS28-ESR显著相关，反映RA患者病情程度的指标CRP与IL-6(r=0.515)、 IL-12P70(r=0.530)、 IL-4(r=0.539)、 IL-10(r=0.434)呈正相关，ESR与IL-6(r=0.403)、 IL-12P70(r=0.475)、 TNF-α(r=0.497)、 IL-4(r=0.450)呈正相关。与CRP、 ESR正常组比较，CRP异常组中IL-6、 IL-12P70、 IL-2、 IL-4、 IL-10水平升高，ESR异常组中IL-12P70、 IL-4、 TNF-α水平升高。RA组患者IL-8、 IFN-α、 IFN-γ表达较健康组升高。结论 血清中炎症相关细胞因子检测对RA的早期诊断和病情程度判断有重要的参考价值，可作为确诊RA的重要预测指标。

经典的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)发挥促炎作用实现抗肿瘤免疫，但是通过改造CAR的结构设计也可以使其有类似M2的抗炎功能，从而治疗炎症性疾病。目前靶向M1型小胶质细胞的CAR-M疗法能够有效减少神经炎症，用于治疗炎症相关抑郁症。随着关于CAR-M抗炎作用的研究不断发展，CAR-M细胞疗法为治疗炎症相关疾病提供了新的思路。

目的 探讨白细胞介素33(IL-33)对哮喘小鼠炎症反应的调控机制。方法 利用10μg/mL脂多糖(LPS)构建小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)的体外细胞炎症模型，根据是否转染IL-33的小干扰RNA(si-IL-33)质粒和过表达(IL-33-OE)质粒，将细胞分成si-IL-33组，IL-33-OE组和模型组。实时荧光定量PCR检测IL-33、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、IL-1β和IL-6的信使RNA(mRNA)表达水平。钙离子荧光探针检测试剂盒(Fluo-3 AM)检测钙离子含量，JC-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位变化。利用腹腔注射致敏剂和激发剂的方法建立小鼠哮喘模型，根据处理方案的不同，将哮喘小鼠分成si-IL-33组、 IL-33-OE组和模型组，每组5只。ELISA试剂盒检测小鼠血清IL-1β、IL-6和NLRP3含量，HE染色和Masson染色检测肺组织的病变情况。结果 与模型组相比，si-IL-33组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量均降低，IL-33-OE组的IL-33、NLRP3、IL-1β和IL-6的mRNA表达量增加。BMMSC中钙离子荧光降低，而IL-33-OE组中钙离子荧光升高。si-IL-33组细胞线粒体中JC-1以聚合物形式存在，呈明亮的红色荧光，细胞中的绿色荧光非常弱；说明si-IL-33组细胞线粒体稳定，线粒体功能尚在。使用IL-33-OE质粒处理使线粒体膜电位下降后，JC-1不能以聚合物形式存在于线粒体基质中，此时线粒体内红色荧光强度显著降低，而细胞质中的绿色荧光显著增强。si-IL-33组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显降低，而IL-33-OE组小鼠血清中IL-1β、IL-6、NLRP3的含量明显升高。si-IL-33组几乎未见炎细胞浸润，炎症缓解，上皮细胞正常。si-IL-33组肺组织的纤维增生部分趋于正常。与模型组相比，si-IL-33组的支气管壁总面积(WAt)/支气管基底膜周径(Pbm)和气管壁平滑肌面积(WAm)/Pbm降低，IL-33-OE组的WAt/Pbm和WAm/Pbm增加。结论敲低IL-33通过下调NLRP3、IL-1β、IL-6表达抑制哮喘小鼠的炎症反应。

目的 研究慢病毒介导的γ干扰素(IFN-γ)及可溶性程序性细胞死亡蛋白1(sPD-1)过表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)生物活性及遗传稳定性的影响。方法 全骨髓贴壁法分离培养BMSC;流式细胞术鉴定BMSC表面标志物的表达；扩增分别带有绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)的IFN-γ及sPD-1基因序列，通过慢病毒转染分别构建IFN-γ、 sPD-1和IFN-γ/sPD-1双基因过表达的BMSC,采用倒置显微镜观察细胞形态，实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测IFN-γ和sPD-1的mRNA和蛋白表达；CCK-8法、 BMSC端粒酶活性检测法分析IFN-γ和sPD-1过表达BMSC的生物活性和遗传稳定性。结果 成功分离培养了CD44、 CD105阳性，CD34、 CD11b、 CD45阴性的BMSC。与空载体组相比，IFN-γ/sPD-1联合组的IFN-γ、 sPD-1 mRNA表达水平显著提高，但各组细胞生长情况类似。与空载体组相比，IFN-γ组端粒酶活性显著降低，但sPD-1组和IFN-γ/sPD-1联合组端粒酶活性变化不明显。结论 IFN-γ和sPD-1联合过表达的BMSC具有较高生物活性和遗传稳定性。

目的 该实验旨在验证间质上皮转化单链抗体(Met scFv)在体内对皮下移植瘤裸鼠的抗肿瘤作用。方法 建立裸鼠肿瘤模型，皮下注射A549肺腺癌细胞，成瘤后通过腹腔注射IRDye680 LT N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯标记的Met scFv,借助小动物成像仪进行实时监测以观察该抗体在荷瘤小鼠体内的动态分布情况，检测肿瘤组织细胞c-Met与抗体的亲和力，定期尾静脉注射Met scFv,观察肿瘤体积变化并绘制肿瘤生长曲线。免疫组织化学染色法检测Met scFv是否能有效结合肿瘤组织中的c-Met抗原。结果 裸鼠体内分布结果表明，在最初的3 h内，Met scFv主要分布于腹腔内。经过大约48 h,荧光信号开始在肿瘤组织中聚集。瘤体免疫组织化学染色结果显示，肿瘤组织中c-Met高表达；定期尾静脉注射Met scFv,可使小鼠瘤体生长明显减缓。结论 Met scFv在体内特异性识别肿瘤细胞且表现出显著的抗肿瘤活性。

巨噬细胞(MAC)和经典树突状细胞(cDC)是免疫防御的首要防线，在先天免疫和适应性免疫中扮演着重要角色，它们具有高度组织特异性，能够精确的适应环境变化。MAC在维持组织稳态和免疫监视方面发挥作用，而cDC作为最有效的抗原提呈细胞，在免疫应答中起关键作用。这两种细胞类型之间也存在相似性和相互联系，MAC和cDC都能识别病原体和组织损伤，它们通过分泌细胞因子激活其他先天免疫细胞，并通过与T细胞的相互作用启动或调节适应性免疫。本文总结了静息与感染过程中MAC及cDC的发育及功能的研究进展，阐述了它们在免疫系统中的关系和相互作用，为疾病的深入研究提供了理论基础。

目的 通过生物信息学方法分别对糖尿病肾病(DKD)患者肾小球与肾小管病变的转录组学进行分析，筛选关键的免疫相关转录因子。方法 下载基因表达数据集(GEO)数据库GSE30528、 GSE30529数据集与Karolinska肾脏研究中心转录组测序(RNA-seq)数据集。通过基因集富集分析(GSEA)明确DKD肾小球与肾小管免疫基因表达有无差异。应用R软件limma包和DEseq2包分别对芯片数据及RNA-seq数据进行差异分析，提取其中差异表达的免疫基因及转录因子，通过共表达分析获取免疫相关转录因子。应用蛋白质相互作用的STRING数据库及Cytoscape软件构建转录因子与免疫相关基因的蛋白质互相作用网络(PPI)。最后通过肾基因表达分析工具Nephroseq数据库分析关键的免疫相关转录因子与临床病理参数的相关性。结果与正常对照组织相比，DKD肾小球和肾小管组织免疫基因有明显的表达差异。通过差异分析及共表达分析方法，肾小球转录组共得到50个免疫基因及9个免疫相关转录因子；肾小管转录组共得到131个免疫基因及41个免疫相关转录因子。PPI网络中，肾小球关键的免疫相关转录因子为干扰素调节因子8(IRF8)、乳运铁蛋白(LTF)、 CCAAT/增强子结合蛋白α(CEBPA)、 Runt相关转录因子3(RUNX3),肾小管关键的免疫相关转录因子为FBJ小鼠骨肉瘤病毒癌基因同源蛋白B(FOSB)、核受体亚家族4A组成员1(NR4A1)、 IRF8与信号转导子及转录激活子1(STAT1),以上转录因子均与肾小球滤过率(GFR)呈显著相关性。结论 生物信息学分析获得了DKD发病与免疫调节异常相关的可能基因，进一步验证这些基因的表达及功能有助于DKD的免疫治疗研究。

内质网（ER）是维持细胞内Ca²⁺稳态、折叠新合成的分泌蛋白和膜蛋白以及蛋白质翻译后修饰的重要细胞器。ER腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集，可激活内质网应激（ERS）,进而激活蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、需肌醇酶1α（IRE-1α）和活化转录因子6（ATF6）三个不同的下游信号通路影响细胞的存活、分化和表型转换。近年来研究表明ERS下游信号级联反应与诱导巨噬细胞向促炎性M1型极化（IFN-γ和LPS）和抗炎性M2型极化（IL-4和IL-10）的信号通路之间存在密切相互作用，但两者之间的具体分子机制错综复杂。文中总结了ERS介导巨噬细胞极化的主要机制，重点讨论了ERS的三个不同下游信号影响巨噬细胞极化的分子机制。

目的 研究细胞周期相关肿瘤高表达蛋白（CREPT）在前列腺癌中的表达情况和对前列腺癌发生发展的影响。方法采用基因表达谱交互分析数据库2（GEPIA2）和癌基因组图谱（TCGA）数据库进行生物信息学分析，22Rv1前列腺癌细胞转染CREPT小干扰片段下调CREPT表达，采用CCK-8法、 Transwell^TM实验和划痕愈合实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移。体内裸鼠荷瘤实验检测CREPT对前列腺癌发生发展的影响。结果 CREPT在前列腺癌中异常高表达，并与无进展生存期、肿瘤T分期、 N分期、前列腺特异性抗原（PSA）水平和Gleason评分相关。CREPT能够促进前列腺癌22Rv1细胞增殖、侵袭和迁移。体内裸鼠荷瘤实验表明CREPT能够促进前列腺癌的进展。免疫浸润分析结果表明CREPT高表达与CD8⁺ T细胞的浸润呈负相关。结论 CREPT是潜在前列腺癌预后标志物，有望成为前列腺癌新的治疗靶点。

目的 探讨基膜聚糖（LUM）在卵巢癌顺铂耐药中的作用机制，并初步探索其对1型辅助T（Th1）细胞分化的影响。方法 通过基因表达数据集（GEO）筛选卵巢癌顺铂耐药株及敏感株中差异表达的基因，通过实时定量PCR检测其表达水平。利用小干扰RNA（siRNA）敲低人卵巢癌细胞中LUM表达，并用Western blot法验证敲低效率。通过流式细胞术检测敲低LUM对顺铂处理后的卵巢癌细胞系周期及凋亡的影响。通过蛋白质相互作用（PPI）网络筛选LUM潜在靶蛋白，并用分子对接验证其相互作用。肿瘤免疫评估资源数据库（TIMER）筛选LUM对卵巢癌系分泌细胞因子的影响，并利用ELISA与实时定量PCR验证。流式细胞术分析LUM对共培养的CD4⁺ T细胞分化的调控作用。结果 GEO数据显示LUM在顺铂耐药株中显著上调，且其表达水平与患者预后相关。LUM在卵巢癌顺铂耐药细胞株中表达水平较高，且顺铂治疗能促进LUM的表达。敲低LUM增加顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡和细胞周期阻滞，提高药物敏感性。靶基因筛选表明，LUM可能通过与Src同源域磷酸酶2（SHP2）相互作用调控卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。另外，TIMER分析结果提示高表达LUM抑制Th1细胞分化，在卵巢癌耐药株中敲低LUM促进Th1细胞分化，通过调控γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素12（IL-12）分泌影响免疫细胞的肿瘤杀伤力。结论LUM在卵巢癌顺铂耐药中表达上调，可能通过调控SHP2相关信号通路降低卵巢癌细胞顺铂敏感性。LUM还通过调控卵巢癌细胞细胞因子分泌，进而抑制Th1细胞分化，促进肿瘤耐药性产生，可能是卵巢癌治疗新的潜在靶点。

目的 筛选一种抗人密封蛋白18剪接变异体2(Claudin18.2)的单克隆抗体(mAb),并基于该抗体序列构建靶向Claudin18.2的嵌合抗原受体T (CAR-T)细胞，用于开发CAR-T细胞疗法。方法 用人Claudin18.2抗原免疫小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合，经筛选获得小鼠抗人Claudin18.2 mAb。以抗体序列为模板PCR扩增出重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)序列，用接头(linker)连接成单链抗体(scFv),并用此scFv构建CAR。将CAR克隆至慢病毒表达载体中，用包装好的慢病毒感染T细胞制备出抗Claudin18.2 CAR-T细胞。结果 筛选到的小鼠抗人Claudin18.2 mAb对人和鼠的Claudin18.2抗原都有结合能力，亲和力高于对照抗体。构建的CAR-T细胞在效靶比1∶9时，对过表达Claudin18.2的阳性靶细胞的杀伤率在50%～70%。结论 制备的小鼠抗人Claudin18.2 mAb具有人鼠双种属特异性，组织特异性良好，亲和力高。构建的anti-Claudin18.2 CAR-T细胞对靶细胞具有良好杀伤效果。

目的 检测肺结核（PTB）患者外周血协同刺激分子CD28、 CD152/细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA4）、程序性死亡受体1（PD-1）和自然杀伤（NK）细胞的水平，探讨PTB患者T细胞亚群活化和NK细胞功能，以及T细胞协同刺激信号分子在PTB发病机制中的作用。方法 募集32名PTB患者（PTB组）和同期健康体检人员15名（对照组）。流式细胞术检测外周血T淋巴细胞CD28、 CD152的表达，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析两者之间的关系，流式细胞术检测外周血调节性T细胞（Treg）表面分子PD-1的表达以及NK细胞的比例。结果 与对照组相比，PTB组CD8⁺CD28⁺T细胞比例、 CD8⁺CD152⁺T细胞比例显著偏低。ROC曲线显示，变量CD8⁺CD152⁺T细胞比例对PTB的预测能力有一定准确性（AUC=0.800,CI=0.664～0.936）。CD4⁺CD28⁺T细胞以及CD4⁺CD152⁺T细胞比例无预测价值。PTB患者的CD4⁺CD28⁺T细胞和CD8⁺CD28⁺T细胞具有正相关关系（r=0.563）。与对照组相比，PTB组患者NK细胞比例显著降低。结论 PTB患者CD8⁺CD152⁺T细胞、 CD8⁺CD28⁺T细胞、 NK细胞比例显著降低。

课程思政是现代高等教育的重要组成部分，在医学类等专业课程教学中融入思政教育是落实高校立德树人的重要途径。医学模块化整合课程是目前国内医学院校广泛采用的一种医学教育模式。本文以“细胞与分子基础”整合课程为例，总结了我们在该模块化整合课程教学中的思政探索与实践。首先更新教学理念，专业课程与思政协同育人；其次重塑课程目标，知识、能力和素养并重；最后，深入挖掘思政元素，建立了丰富的思政素材库：弘扬中国科学家精神，筑牢政治素养，传承中华优秀传统文化，坚定文化自信，共享诺贝尔奖得主的故事，培养科学精神，以学风和学术规范为镜，强化职业素养，严守伦理和道德底线，提高法治意识。通过以上举措，以专业知识为载体，实现知识、能力与思政教育同向同行，协同育人，同时提升教师的思政意识与能力。

目的 分析患者血清中存在类同种Kidd血型系统抗Jk^a、抗Jk^b和Duffy血型系统抗Fy^b特异性自身抗体的血型血清学鉴定结果及其输血策略。方法 采用试管盐水法（NS）、微柱凝胶试验（MGT）,对患者血标本进行ABO、 Rh血型鉴定及直接抗人球蛋白试验（DAT）,采用间接抗人球蛋白试验（IAT）对患者血清进行不规则抗体筛选、抗体特异性鉴定、患者红细胞对应血型抗原鉴定、吸收放散试验进行验证及交叉配血试验，为患者筛选不含对应血型抗原的红细胞进行输血治疗。结果 6例患者中B型5例、 AB型1例，RhD抗原均为阳性，2例Jk^a+b-、 1例Jk^a-b+、 2例Fy^a-b+、 1例Jk^a-b+和Fy^a-b+, DAT均为阳性。患者血清中存在类同种特异性抗Jk^a抗体2例、抗Jk^b抗体1例、抗Fy^b抗体2例、抗Jk^b+抗Fy^b抗体1例，与类同种特异性抗体所对应的红细胞血型抗原为阳性。抗体类型为IgG型，类抗Jk^a抗体效价为1∶4、类抗Jk^b抗体效价为1∶2、类抗Fy^b抗体效价为1∶2。结论 类同种特异性抗体通常为自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者的自身抗体，可干扰血清学检测结果和引起溶血性输血反应，输注对应血型抗原阴性的血液是保证输血安全和有效的重要措施。

目的 探究蛋白C受体（PROCR）在全葡聚糖颗粒（WGP）作用下对小鼠骨髓源性树突状细胞（BMDC）成熟过程及其免疫相关功能的调控效应。方法 从NCBI的基因表达数据集（GEO）数据库中下载GSE2197数据集，随后通过深入分析该数据集的芯片数据，识别并获得了差异表达基因（DEG）。从免疫学数据库和分析门户网站（IMMPORT）数据库中下载并整理与免疫功能相关的基因，与DEG取交集得到免疫相关的差异基因。通过运用专门的R包等生物信息学算法，成功识别了关键基因并解析了相关的信号通路。实时定量PCR检测BMDC经WGP刺激前后的差异基因。在体外实验中，从小鼠的胫骨和腓骨中抽取骨髓，并利用FMS样酪氨酸激酶3配体（Flt-3L）诱导这些骨髓细胞分化成BMDC。经过诱导后，对这些BMDC进行转染处理，并随后使用WGP进行刺激。为了评估BMDC的免疫表型，利用流式细胞术分析了细胞表面分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅰ/Ⅱ（MHC-Ⅰ/Ⅱ）以及程序性死亡蛋白1配体1（PD-L1）的表达情况。此外，为了探究BMDC的免疫调节功能，利用ELISA技术检测了BMDC上清液中细胞因子白细胞介素12p40（IL-12p40）、IL-6、IL-10的分泌含量。在T细胞实验中，我们利用OT-Ⅰ和OT-Ⅱ小鼠的淋巴结和脾脏，通过磁珠分选试剂盒成功分离出CD8⁺和CD4⁺ T细胞。随后，我们将这些T细胞与特异性抗原卵清蛋白（OVA）以及之前制备的BMDC进行共培养。最后，利用流式细胞术检测了T细胞的增殖与分化情况，以评估BMDC在抗原特异性T细胞反应中的作用。结果 经过分析WGP诱导的与CpG（GSE2197）刺激的BMDC的差异基因，与IMMPORT数据库中的免疫基因取交集，筛选到PROCR基因。数据显示敲低PROCR基因后，经WGP激发的BMDC的表面分子MHC-Ⅰ明显降低，细胞因子IL-10的分泌显著增多；其驱使CD8⁺T细胞产生γ干扰素（IFN-γ）的能力明显减弱。结论 在WGP诱导BMDC成熟的过程中，PROCR对MHC-Ⅰ的表达以及IL-10的分泌具有调控作用，进而调节BMDC诱导CD8⁺IFN-γ⁺T细胞增殖与分化的功能。

目的 探究二肽基肽酶3（DPP3）通过调控主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因B （MICB）的表达对胃癌细胞免疫逃逸的影响。方法 敲低MKN-45人胃癌细胞DPP3、过表达MGC-803人胃癌细胞DPP3,观察细胞增殖、迁移能力变化及对自然杀伤（NK）细胞杀伤的反应性；采用全转录组测序筛得MICB基因，在过表达DPP3细胞中敲低MICB验证细胞行为变化。在C57小鼠验证敲除DPP3细胞的体内成瘤能力及组织中CD56⁺细胞浸润情况。结果 敲除DPP3促进胃癌细胞增殖、迁移，降低MICB表达，对NK细胞杀伤效应不敏感；小鼠成瘤能力升高且组织中CD56⁺细胞浸润降低。过表达DPP3的胃癌细胞则呈现相反结果。敲减MICB后能逆转DPP3高表达引起的细胞表型变化。结论 DPP3通过下调MICB表达抑制胃癌细胞的免疫逃逸功能。

目的 通过抗体的随机突变库和细胞展示技术，对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子（c-Met）抗体进行结构和活性优化，获得亲和力高、激动活性低的抗体，并使其保持亲本抗体的中和及内化活性，提高抗体偶联药物（ADC）的成药性。方法 构建和筛选c-Met中和激动型抗体3E1D7的重链互补决定区3（CDR3）随机突变库，获得CDR3区有4个氨基酸突变的候选抗体2G5。通过ELISA检测2G5的中和活性，流式细胞术检测其在A549细胞的内化，CCK-8法检测2G5对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响，通过Transwell^TM小室检测2G5对A549细胞迁移的影响，通过Western blot法检测2G5对c-Met磷酸化的影响。结果 突变抗体2G5与抗原c-Met保持较高的结合能力，半数有效浓度(EC₅₀)为41.53 ng/mL,并具有较高的中和活性。在A549细胞中，2G5引起显著的内化效应，但不激活c-Met信号通路和细胞迁移。2G5不能引起HUVEC增殖。结论通过建立抗体随机突变库可优化c-Met抗体的活性，获得成药性更高的突变型抗体。

目的 探讨新风胶囊(XFC)含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响。方法 XFC灌胃大鼠，制备含药血清。人RA-FLS来源于RA患者滑膜组织，用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。构建pcDNA3.1-circ-CBLB及阴性对照，分别转染至RA-FLS中。实验分为对照组、 TNF-α处理的RA-FLS组、 XFC处理的RA-FLS组、 pcDNA3.1-circ-CBLB-NC转染的RA-FLS组(过表达空转组)、 pcDNA3.1-circ-CBLB转染的RA-FLS组(过表达组)、 pcDNA3.1-circ-CBLB联合XFC处理的RA-FLS组(过表达给药组)。采用CCK-8法检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞周期与凋亡，采用实时定量PCR检测circ-CBLB表达水平，采用ELISA检测抗炎因子白细胞介素4(IL-4)、 IL-10,促炎因子IL-6、 TNF-α水平。结果 XFC最佳含药血清量为200 mL/L,处理时间为72 h;与同一时间模型组相比，XFC组、过表达组、过表达给药组的细胞活力均下降。与模型组比较，XFC组、过表达组、过表达给药组circ-CBLB表达水平升高、凋亡率升高，S期和G2期细胞比例增加，IL-4、 IL-10含量升高，IL-6、 TNF-α含量降低。结论 XFC处理上调RA-FLS中circ-CBLB表达，提高抗炎因子的水平，降低促炎因子的水平，抑制RA-FLS的细胞活力，提高其凋亡率，延长细胞周期，抑制RA-FLS增殖并促进其凋亡。

目的 探讨CXC趋化因子配体8（CXCL8）对结直肠癌（CRC）微环境的免疫调节作用。方法 使用过表达CXCL8的鼠源CRC细胞株CT26细胞建立BALB/c小鼠皮下移植瘤模型，监测肿瘤生长情况，成瘤三周后剥离肿瘤组织并取出小鼠脾脏，一方面制备肿瘤单细胞悬液，流式细胞术检测肿瘤微环境中M2型巨噬细胞及CD8⁺ T细胞的浸润情况；另一方面制备脾脏单细胞悬液，分选脾脏CD8⁺ T细胞，在体外将T细胞与过表达CXCL8的CT26细胞共培养，细胞毒性实验检测T细胞杀伤能力。结果 过表达CXCL8促进小鼠CRC移植瘤生长；过表达CXCL8的CRC组织中M2型巨噬细胞浸润增加、 CD8⁺ T细胞浸润减少；过表达CXCL8的小鼠CRC细胞并不影响CD8⁺ T细胞体外杀伤能力。结论 CXCL8过表达CRC细胞通过增加M2型巨噬细胞浸润及抑制CD8⁺ T细胞浸润促进CRC免疫抑制微环境的形成。