驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选

何婉钧, 崔愷, 张西倩, 蒋丹, 徐广贤

细胞与分子免疫学杂志 ›› 2025, Vol. 41 ›› Issue (03) : 254-261. DOI: 10.13423/j.cnki.cjcmi.009916

驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选

  • 何婉钧, 崔愷, 张西倩, 蒋丹, 徐广贤
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摘要

目的 筛选出抗CD22特异性纳米抗体,为其作为免疫治疗制剂提供基础。方法 构建天然噬菌体纳米抗体展示文库,分析其多样性。以生物素化CD22抗原为靶点,进行3轮生物素链霉亲和素液相筛选法,初步通过ELISA和基因测序鉴定抗CD22纳米抗体序列。结果 经测定,构建的噬菌体纳米抗体展示文库容量为3.89×10~9 CFU/mL,插入有效片段高于85%。基于此文库,初步筛选出7条抗CD22纳米抗体,其氨基酸序列比对结果显示,整体相似性为70.34%,均为亲水性蛋白。蛋白-蛋白复合物对接预测结果表明,5条纳米抗体序列的模拟蛋白都可以配对连接到CD22,主要作用力为疏水相互作用和氢键。结论 本研究为靶向CD22的嵌合抗原受体T细胞的研究提供基础,成功构建天然噬菌体纳米抗体展示文库,获得5条抗CD22特异性的纳米抗体。

关键词

CD22 / 纳米抗体 / 噬菌体展示文库

中图分类号

R392

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何婉钧, 崔愷, 张西倩, 蒋丹, 徐广贤. 驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选. 细胞与分子免疫学杂志. 2025, 41(03): 254-261 https://doi.org/10.13423/j.cnki.cjcmi.009916

基金

宁夏回族自治区重点研发计划(2022CMG03123,2022CMG02041); 广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515140148); 广东医科大学附属东莞第一医院高层次人才科研资助计划项目(GCC2023004); 广东医科大学博士科研启动基金(4SG23190G)

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