目的 探究基本螺旋-环-螺旋家族成员E40（BHLHE40）对骨肉瘤（OS）细胞侵袭、迁移的影响，并探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B （PI3K/AKT）信号通路相关机制在BHLHE40介导OS肿瘤生物学行为中的作用，为OS的靶向治疗提供科学依据。方法 基于OS临床样本及OS细胞系，分析BHLHE40在OS与癌旁组织之间以及OS细胞与成骨细胞表达的差异。shRNA转染法获得BHLHE40敲低表达的OS细胞系，采用CCK-8、EdU染色、划痕及Transwell^TM实验探究BHLHE40对OS细胞增殖、侵袭及迁移的作用，利用Western blot法检测PI3K/AKT信号通路。并在体内实验中进一步验证。结果 骨肉瘤组织中BHLHE40的表达显著高于癌旁组织，与正常骨细胞相比，OS细胞系中BHLHE40蛋白表达水平增加，选择BHLHE40表达最高的细胞株进行后续敲低实验。与对照组相比，BHLHE40敲低组的细胞活力、EdU阳性细胞数、集落数量、细胞侵袭和迁移能力降低，磷酸化的PI3K（p-PI3K）/PI3K和磷酸化的AKT（p-AKT）/AKT蛋白表达下调。且体内实验复现了上述BHLHE40的功能。结论 BHLHE40在OS组织中高表达，敲低其表达可显著抑制OS细胞增殖、侵袭、迁移并降低PI3K/AKT信号通路，提示了其可作为OS治疗的新靶点。