黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达

杨凯, 潘颖, 刘萍, 宇芙蓉, 魏晓康, 张发苏, 王琴

细胞与分子免疫学杂志 ›› 2024, Vol. 40 ›› Issue (08) : 704-709. DOI: 10.13423/j.cnki.cjcmi.009810

黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达

  • 杨凯, 潘颖, 刘萍, 宇芙蓉, 魏晓康, 张发苏, 王琴
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摘要

目的 研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法 采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达;采用MxA小干涉RNA(si-MxA)转染HepG2细胞并以α干扰素(IFN-α)处理细胞,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞黏液病毒抗性蛋白A(MxA)、蛋白激酶R(PKR)和寡聚腺苷酸合成酶(OAS)的mRNA表达,Western blot法检测MxA、PKR、OAS、细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、STAT2、p-STAT2和干扰素调节因子9(IRF9)的蛋白表达。此外,pcDNA3.1-Flag-MxA与pISRE-TA-luc分别共转染至HepG2和HepG2.2.15细胞,荧光素酶活性检测干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。结果 MxA蛋白在HepG2细胞质和细胞核均有表达且细胞质表达量高于胞核。敲低HepG2细胞中MxA表达虽不影响IFN-α诱导的STAT1、p-STAT1、STAT2、p-STAT2和IRF9蛋白的表达,但显著降低抗病毒蛋白PKR和OAS的表达。过表达MxA的HepG2细胞ISRE活性增强且PKR和OAS蛋白表达增高,但这种效应却在HepG2.2.15细胞中被抑制。结论 MxA通过增强JAK/STAT信号通路ISRE活性诱导抗病毒蛋白表达。

关键词

黏病毒抗性蛋白A(MxA) / Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT) / 干扰素刺激应答元件(ISRE) / 干扰素刺激基因(ISG)

中图分类号

R392

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杨凯, 潘颖, 刘萍, 宇芙蓉, 魏晓康, 张发苏, 王琴. 黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达. 细胞与分子免疫学杂志. 2024, 40(08): 704-709 https://doi.org/10.13423/j.cnki.cjcmi.009810

基金

安徽省高校省级自然科学研究重大项目(KJ2020ZD68); 安徽教育厅省级教学质量工程(2020jyxm0950)

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