目的 研究慢病毒介导的γ干扰素(IFN-γ)及可溶性程序性细胞死亡蛋白1(sPD-1)过表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)生物活性及遗传稳定性的影响。方法 全骨髓贴壁法分离培养BMSC;流式细胞术鉴定BMSC表面标志物的表达；扩增分别带有绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)的IFN-γ及sPD-1基因序列，通过慢病毒转染分别构建IFN-γ、 sPD-1和IFN-γ/sPD-1双基因过表达的BMSC,采用倒置显微镜观察细胞形态，实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测IFN-γ和sPD-1的mRNA和蛋白表达；CCK-8法、 BMSC端粒酶活性检测法分析IFN-γ和sPD-1过表达BMSC的生物活性和遗传稳定性。结果 成功分离培养了CD44、 CD105阳性，CD34、 CD11b、 CD45阴性的BMSC。与空载体组相比，IFN-γ/sPD-1联合组的IFN-γ、 sPD-1 mRNA表达水平显著提高，但各组细胞生长情况类似。与空载体组相比，IFN-γ组端粒酶活性显著降低，但sPD-1组和IFN-γ/sPD-1联合组端粒酶活性变化不明显。结论 IFN-γ和sPD-1联合过表达的BMSC具有较高生物活性和遗传稳定性。