敲低双特异性磷酸酶5(DUSP5)通过阻断NF-κB信号抑制卡介苗诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应

任超, 刘文淼, 骆佳

细胞与分子免疫学杂志 ›› 2024, Vol. 40 ›› Issue (05) : 404-410. DOI: 10.13423/j.cnki.cjcmi.009779

敲低双特异性磷酸酶5(DUSP5)通过阻断NF-κB信号抑制卡介苗诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应

  • 任超, 刘文淼, 骆佳
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摘要

目的 探讨双特异性磷酸酶5(DUSP5)对卡介苗(BCG)介导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应的调控作用。方法Western blot法检测BCG感染RAW264.7巨噬细胞0.5、 1、 2、 4、 6、 8、 12、 24 h,DUSP5表达变化;采用小干扰RNA(siRNA)技术下调RAW264.7巨噬细胞DUSP5水平,并设置siRNA阴性对照(si-NC)组、 DUSP5敲低(si-DUSP5)组、 si-NC联合BCG感染组、 si-DUSP5联合BCG感染组。实时定量PCR检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10的mRNA表达,ELISA检测细胞上清液IL-1β、 IL-6、 TNF-α、 IL-10含量;Western blot法检测细胞核因子κB(NF-κB)与磷酸化的NF-κB(p-NF-κB)表达变化。结果 BCG感染上调RAW264.7巨噬细胞核DUSP5蛋白表达,并在BCG刺激4 h后,DUSP5表达量达到高峰;与si-NC联合BCG感染组相比,敲低DUSP5抑制细胞促炎因子IL-1β、 IL-6与TNF-α表达与分泌,而抑炎因子IL-10表达不受DUSP5的影响;且敲低DUSP5抑制细胞NF-κB磷酸化。结论 敲低DUSP5通过阻断NF-κB信号抑制BCG介导的巨噬细胞炎性反应。

关键词

卡介苗(BCG) / 双特异性磷酸酶5(DUSP5) / RAW264.7巨噬细胞 / 炎性反应

中图分类号

R392

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任超, 刘文淼, 骆佳. 敲低双特异性磷酸酶5(DUSP5)通过阻断NF-κB信号抑制卡介苗诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎性反应. 细胞与分子免疫学杂志. 2024, 40(05): 404-410 https://doi.org/10.13423/j.cnki.cjcmi.009779

基金

宁夏自然科学基金(2022AAC03471); 宁夏医科大学校级项目(XM2022035)

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