目的 建立独活寄生丸的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并分别评价高温蒸汽灭菌、60Co辐照灭菌对独活寄生丸指纹图谱的影响。方法 采用Venusil MP-C18色谱柱，以0.1%磷酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长（254 nm和325 nm），并对建立的色谱条件进行方法学考察，通过分析12份样品建立独活寄生丸的指纹图谱。采用指纹图谱相似度评价分析、多元统计分析方法，分别分析高温蒸汽灭菌、60Co辐照灭菌对独活寄生丸化学成分的影响。结果 方法学考察显示，建立指纹图谱的色谱方法符合要求。通过12份样品的测定，建立了独活寄生丸HPLC指纹图谱，相似度为0.994～1.000，共确认了19个共有峰。高温蒸汽灭菌会影响独活寄生丸中14个化学成分，而60Co辐照灭菌不影响独活寄生丸中的化学成分。结论 建立的HPLC指纹图谱方法准确可靠、具有良好的重复性。高温蒸汽灭菌会影响独活寄生丸的指纹图谱，而60Co辐照灭菌对独活寄生丸的指纹图谱没有影响。