目的 对ABO血型血清学鉴定异常的1例受试者进行血型鉴定及家系分析，为解决疑难血型的鉴定及遗传规律提供科学依据。方法 在常规血清学鉴定基础上，使用序列特异引物引导的聚合酶链反应（PCR-SSP）扩增受试者外周血ABO基因的6、7外显子，使用Sanger测序分析先证者及子女的血型基因型并调查家系。构建3D分子结构模型，预测突变后的半乳糖基转移酶（Cgt B）的热力学稳定性（??G）、不稳定系数以及分子间作用力（范德华力）进行预测。结果 先证者血清学表型符合B（A）或A_WB亚型；女儿血清学表型符合cis AB或AB₃；儿子血清学表型符合A型。先证者与其女儿正反定型不符。将3名受试者血型的测序结果与标准序列A101比对，先证者7号外显子存在c.700C>G且6号外显子存在c.261del G，基因型为ABO*B（A）。02/ABO*O.01.13；女儿7号外显子存在c.700C>G且存在c.467C>T，基因型为ABO*B（A）。02/ABO*A1.02；儿子7号外显子存在c.467C>T且6号外显子存在c.261del G，基因型为ABO*A1.02/ABO*O.01.13。分子建模与分析提示突变后Cgt B的??G为负值，不稳定系数较高且突变后其结构丢失2个碳原子。结论 当标准血型血清学ABO血型正反定型不符时，利用分子生物学检测技术可以确定血型基因型弥补血清学方法的不足。根据本研究构建的生物信息学模型预测突变后的Cgt B为不稳定蛋白，可能导致其B（A）亚型表现型。通过生物信息学模型可以揭示罕见ABO亚型的血清学表型、基因型的特点及遗传规律，为临床输血提供保障。