目的 探索孕期不同阶段补充维生素D(vitamin D,VD)对后代仔鼠空间学习和记忆能力的改善作用。方法 按照体质量将4周龄SD雌性大鼠随机分为5组：对照组（control group,Ctrl组）、VD缺乏组（vitamin D deficiency group,VDD）、孕早期补充组（first trimester supplementation group,FTS）、孕中期补充组（second trimester supplementation group,STS）和孕晚期补充组（third trimester supplementation group,TTS），每组5只。Ctrl组采用标准饲料喂养，VDD组、FTS组、STS组和TTS组采用VD缺乏饲料喂养。喂养8周后，雌雄合笼，交配成功后，Ctrl组采用标准饲料喂养，VDD组采用VD缺乏饲料喂养，FTS组从妊娠0 d(GD0)开始采用标准饲料喂养，STS组从GD7开始时采用标准饲料喂养，TTS组从GD14开始时采用标准饲料喂养，直至仔鼠21 d离乳。所有仔鼠按照母鼠饲养条件喂养。GD20时检测母鼠血清25-羟基维生素D[25(OH)D]水平，仔鼠断乳后进行Morris水迷宫实验（包括定位航行实验4 d和空间探索实验1 d），于行为学实验结束后检测仔鼠血清25(OH)D、1,25-二羟基维生素D[1,25(OH)2D]水平，苏木精-伊红（HE）染色观察仔鼠海马体组织形态学变化。结果 VD缺乏8周后，与Ctrl组相比，VDD组、FTS组、STS组和TTS组母鼠血清25(OH)D水平均显著降低（P<0.01）。GD20时，与Ctrl组相比，VDD组母鼠血清25(OH)D水平显著降低（P<0.01）；与VDD组相比，FTS组、STS组和TTS组母鼠血清25(OH)D水平均显著升高（P<0.01）。FTS组仔鼠血清25(OH)D水平显著高于VDD组（P<0.01）,FTS组、STS组和TTS组仔鼠血清1,25(OH)2D水平显著高于VDD组（P<0.01）。孕期不同阶段补充VD后子代的体质量均明显增加。定位航行实验中，各组仔鼠随着训练天数的增加，逃避潜伏期逐渐降低；第3天时FTS组、STS组和TTS组仔鼠的逃避潜伏期均显著低于VDD组（P<0.01）；与TTS组相比，FTS组和STS组逃避潜伏期都略有降低，但差异无统计学意义。空间探索实验中，FTS组和STS组仔鼠的逃避潜伏期显著低于VDD组（P<0.05）；与TTS组相比，FTS组和STS组逃避潜伏期显著降低（P<0.05）。与VDD组相比，孕期补充组仔鼠海马CA1区神经元都有不同程度的改善。结论 母鼠VD缺乏会降低仔鼠的学习记忆能力，母鼠孕期不同阶段补充VD均改善了仔鼠的空间学习和记忆能力，其中孕早期补充VD对仔鼠的学习记忆能力改善效果更为显著。