川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞活化和分泌Sema4D

黄君华, 谢小娟, 赵传梅, 张书婉

山西医科大学学报 ›› 2024, Vol. 55 ›› Issue (01) : 65-70. DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2024.01.009

川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞活化和分泌Sema4D

  • 黄君华, 谢小娟, 赵传梅, 张书婉
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摘要

目的 探讨川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞(HCAECs)条件培养基对中性粒细胞生物学功能的影响及机制。方法 2022年12月在西安市儿童医院收集KD患儿和健康儿童混合血清,分别刺激HCAECs作为KD组和HC组,RT-PCR检测两组细胞IL-1β表达。HCAECs分为si-IL-1β组和si-NC组,分别转染IL-1β siRNA和无效siRNA,然后加入KD血清刺激,RT-PCR检测HCAECs中IL-1β mRNA表达。收集si-IL-1β组和si-NC组细胞的培养上清液,经离心和滤菌后分别得到两组细胞的条件培养基,ELISA检测两组条件培养基中IL-1β浓度,Transwell实验检测条件培养基对中性粒细胞迁移能力的影响,流式细胞术检测条件培养基对中性粒细胞凋亡和Sema4D表达的影响。中性粒细胞分为TAPI-1预处理+si-NC条件培养基组、DMSO预处理+si-NC条件培养基组、TAPI-1预处理+si-IL-1β条件培养基组和DMSO预处理+si-IL-1β条件培养基组,用si-IL-1β组或si-NC组条件培养基分别刺激已用金属蛋白酶ADAM17的抑制剂TAPI-1或DMSO预处理的中性粒细胞,流式细胞术检测中性粒细胞Sema4D表达。结果 RT-PCR显示,KD组较HC组HCAECs中IL-1β明显高表达(P<0.01);si-IL-1β组IL-1β mRNA表达较si-NC组明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-IL-1β组条件培养基IL-1β含量明显降低(P<0.01),条件培养基处理的中性粒细胞迁移能力明显下降(P<0.01),而中性粒细胞凋亡和Sema4D表达均增加(P<0.01)。与DMSO预处理+si-NC条件培养基组比较,TAPI-1预处理+si-NC条件培养基组Sema4D+中性粒细胞百分比明显升高(P<0.05),而TAPI-1预处理+si-IL-1β条件培养基组和DMSO预处理+si-IL-1β条件培养基组中性粒细胞Sema4D无明显差异(P>0.05)。结论 川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞迁移并抑制中性粒细胞凋亡,而且可能通过激活ADAM17促进中性粒细胞分泌Sema4D。

关键词

IL-1β / Sema4D / 川崎病 / 中性粒细胞 / 冠状动脉内皮细胞

中图分类号

R725.4

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黄君华, 谢小娟, 赵传梅, 张书婉. 川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞活化和分泌Sema4D. 山西医科大学学报. 2024, 55(01): 65-70 https://doi.org/10.13753/j.issn.1007-6611.2024.01.009

基金

陕西省自然科学基础研究计划项目(2023-JC-YB-718); 西安市卫生健康委员会科研项目(2023qn12); 西安市未央区科技计划项目(202222); 西安医学院科研能力提升计划项目(2022NLTS107)

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