[目的]本研究旨在明确纳米塑料-脲酶蛋白冠的形成及对纳米塑料和脲酶的影响。[方法]以带正电、带负电、不带电的纳米塑料和质量浓度为0.05、0.20、0.50 mg·mL~(-1)的脲酶为试验材料，制备不同的纳米塑料-脲酶混悬液。根据纳米塑料对脲酶的吸附量和形貌特征变化，明确蛋白冠的形成。通过粗糙度、水合粒径、Zeta电位和脲酶构象、活性等指标分析，判定不同条件下蛋白冠的形成对纳米塑料表征及脲酶结构和活性的影响。[结果]不同电性纳米塑料对各浓度脲酶均产生吸附，形成蛋白冠；随着脲酶质量浓度增加，蛋白冠的颗粒粒径和表面粗糙度增加；带正电纳米塑料-脲酶蛋白冠与原纳米塑料差异最显著，且显著抑制脲酶活性；当脲酶质量浓度为0.05 mg·mL~(-1)时，蛋白冠的形成会导致脲酶构象发生明显变化，表现为β-折叠结构含量显著下降，无规则结构含量明显上升的特点。[结论]3种电性纳米塑料均可以和脲酶形成蛋白冠，不同程度降低其分散性和稳定性。蛋白冠对纳米塑料和脲酶的影响强度与纳米塑料的带电性和脲酶质量浓度密切相关。