目的 通过比较咪喹莫特两种不同造模方式构建的斑秃（AA）小鼠模型，探索稳定的AA动物模型的构建方法。方法 48只5～7周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成4组。模型组1和空白对照组1:1次/d、同一时间在小鼠背部涂抹0.2 g咪喹莫特乳膏或凡士林，连续7 d;模型组2和空白对照组2:3次/周、同一时间在小鼠背部涂抹0.2 g咪喹莫特乳膏或凡士林，持续35 d。两种造模方式给药结束后均观察1周。实验中观测小鼠毛发宏观变化，持续监测体质量生长状态变化。给药结束与观察期后分别采集脱毛皮损部位，通过ELISA检测皮损部位IFN-γ浓度表达情况，HE染色观察皮肤毛囊数量变化情况，免疫组化检测脱毛区域附近毛囊CD4⁺、CD8⁺ T细胞浸润情况。结果 咪喹莫特两种给药方式造模后，模型组1小鼠于第3日出现涂抹部位毛发脱落，7 d后脱落完全；造模后潮红的脱毛部位在观察期第5日转呈青色，第7日开始有微小毛发生长，毛囊表现为造模7 d后萎缩并于观察期内再度恢复生长；与空白对照组1相比，CD4⁺、CD8⁺T细胞在造模结束时出现明显浸润且IFN-γ表达显著（P<0.01）,但观察期内CD4⁺、CD8⁺T细胞浸润减少且IFN-γ表达明显下降；模型组2在造模第35日明显引起宏观毛发脱落，毛发镜可见脱毛部位皮肤光滑；组织病理学显示，与空白对照组2相比毛囊数量大量减少，CD4⁺、CD8⁺T细胞浸润增加明显，IFN-γ显著性表达（P<0.01）,且相关各项指标在观察期内未有明显变化。结论 外用咪喹莫特每周3次、持续35 d建立的C57BL/6 AA模型小鼠，模型持续时间更长，与AA患者发病机制临床吻合度更高，是一种相对稳定、理想的研究AA疾病的动物模型。

目的 运用网络药理学和分子对接技术探讨四逆散“异病同治”溃疡性结肠炎(UC)和慢性胃炎(CG)的潜在作用机制。方法 从TCMSP数据库检索四逆散主要成分及对应靶点，结合DisGeNET、GeneCards和OMIM数据库分别获取两种疾病的靶点，将两者取交集得到四逆散“异病同治”UC与CG的潜在靶点。运用STRING数据库及Cytoscape 3.9.1制作“药物-成分-靶点”网络模型及PPI网络图。运用DAVID数据库对交集靶点进行GO和KEGG富集分析，再通过BioGPS和GeneCards数据库获取组织分布以及亚细胞分布的信息。运用分子对接验证主要成分与关键靶点间的联系。结果 四逆散4味核心药物共含144个活性成分和207个相关靶点，筛选出1 756个UC的疾病靶点以及955个CG的疾病相关靶点，三者取交集共获得64个潜在治疗靶点。GO功能富集结果显示有62个分子功能、39个细胞组成、461个生物过程。KEGG分析得到142条通路途径，其中癌症通路、IL-17信号通路、TNF信号通路可能是四逆散“异病同治”UC和CG的主要途径。分子对接结果显示，主要成分槲皮素、木犀草素、山柰酚、柚皮素、川陈皮素和关键靶点AKT1、TNF、TP53、IL6结合良好。结论 四逆散可能通过槲皮素、木犀草素、山柰酚、柚皮素和川陈皮素等主要活性成分作用于AKT1、TNF、TP53、IL6等核心靶点从而治疗UC和CG,为从现代医学角度更好地理解中医“异病同治”理论提供了支撑依据。

肿瘤免疫治疗当前已成为肿瘤临床治疗的一大利器。然而，免疫逃逸是制约肿瘤免疫治疗疗效的瓶颈问题，导致肿瘤免疫逃逸的关键环节之一是CD8⁺T细胞耗竭。研究表明，CD8⁺T细胞在肿瘤微环境各种免疫抑制性因素的作用下发生表观重编程，导致CD8⁺T细胞耗竭。如何有效靶向调节表观重编程机制抑制CD8⁺T细胞耗竭，是目前亟待解决的重点和难点问题。本文综述了肿瘤微环境CD8⁺T细胞耗竭的特征以及在肿瘤免疫逃逸中的表观重编程机制，并阐明了靶向调节表观遗传机制改善CD8⁺T细胞耗竭的策略，旨在为肿瘤免疫治疗提供新思路、开辟新路径。

目的 了解高原缺氧环境与血脂和肝功能之间关系。方法 选择2022年6月至7月于格尔木某部队医院体检的驻青海格尔木地区(海拔2 900 m)和烟台某部队医院体检的驻山东烟台地区(海拔30 m)的官兵5 034名，分为平原组(n=1 795)和高原组(n=3 239),收集基线资料和肝功、血脂的检查结果，采用斯皮尔曼相关性分析和多重线性回归的方法分析其之间相关关系。结果 平原组与高原组总胆固醇(TC)、谷草转氨酶与谷丙转氨酶比值(AST/ALT)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总蛋白、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血红蛋白、红细胞计数、白蛋白与球蛋白比值、总胆汁酸均有统计学差异，且多重线性回归结果显示年龄、体质量指数(BMI)、高原居住时间、性别、吸烟情况和运动情况可作为甘油三酯(TG)的影响因素，TC的影响因素则为年龄、BMI、高原居住时间、吸烟情况和运动情况。同时TC、TG、HDL-C也是除年龄、BMI、高原居住时间、性别之外的AST/ALT影响因素。结论 高原缺氧作为影响因素可以使人体的血脂指标升高，而血脂的变化同时又可以与年龄、BMI等因素共同作用，影响肝脏功能。

本文在回顾历史和分析中医肿瘤学科发展现状的基础上，提出以往这种以丢掉中医辨病论治特色为代价的辨证论治，长期对经典著作的轻视，就是造成中医肿瘤学科发展瓶颈的深层原因。指出《黄帝内经》(简称《内经》)提示风邪、寒邪入里成瘤的病因学说值得深入研究，基于风为百病之长的中医共识，认为风邪是肿瘤发生发展的重要因素，心神不安是邪风入里的内在条件，多种因素综合是邪风入里成瘤的病机特点，瘙痒是风邪入里成瘤的症状依据。风邪入里成瘤实质是风邪与寒、热、湿、痰、气机、津液、瘀血等夹杂致病，人体阴阳的平衡就是被风邪的变化多端、肆无忌惮的特点所破坏的。表现在症候上是主次先后变化快，涉及脏腑经络多，病情轻重差异大，提出了“风邪入里成瘤说”;《内经》强调肿瘤的形成过程——寒邪凝滞，入里成积；《内经》肿瘤病机强调寒热相搏、津液涩渗；《金匮要略》的肺痿、肠痈，与肺癌、大肠癌关系密切，具有可比性，是恶性肿瘤辨病论治的典范；肿瘤可从六经论治；经方治疗恶性肿瘤大有可为；《神农本草经》在治疗恶性肿瘤方面潜力无限；经方在恶性肿瘤的防治养结合方面越来越受到重视。从而得出激活经典是突破中医肿瘤学科发展瓶颈必由之路的结论。

目的 探讨输注不同血液成分时患者输血不良反应的发生特点及采取的临床对策。方法 收集2016—2023年某三甲医院收治患者的临床资料，分析输血不良反应的发生率和类型、输注的血液制剂种类、发生输血不良反应的科室分布以及治疗措施。结果 2016—2023年该院患者发生输血不良反应共计96例，发生率为0.18‰,主要为非溶血性发热反应(0.04‰)与过敏性输血不良反应(0.14‰),血液制剂中悬浮红细胞与普通冰冻血浆引起输血不良反应的概率较大，输血不良反应发生较多的科室为消化科(15.63%)、神经外科(14.58%)、妇科(14.58%)、肿瘤科(12.50%)和骨科(12.50%),发生过敏反应的患者在停止输血后采用地塞米松(25例)、盐酸异丙嗪(3例)、地塞米松联合盐酸异丙嗪(10例)和地塞米松联合氯雷他定(2例)对症治疗；发生非溶血性发热反应的患者在停止输血后采用地塞米松(6例)和地塞米松联合盐酸异丙嗪(1例)对症治疗。结论 临床上常见的输血不良反应中过敏反应与非溶血性发热反应为主要类型，在临床输血过程中应当对不同类型的血液制剂和用血科室进行针对性预防，不断提高医务人员对输血不良反应的识别以及上报意识，保障输血治疗过程安全有效。

目的 探讨后腹腔镜肾部分切除术(RLPN)治疗肾癌的疗效及Klotho、白蛋白/碱性磷酸酶比值(AAPR)、全身炎症反应指数(SIRI)对预后的预测价值。方法 研究对象选自在宁波市医疗中心李惠利医院接受治疗的肾癌患者，共纳入202例，病例纳入年限为2019年1月至2021年10月，所有患者均给予RLPN,其中有4例失访，最终根据术后3年随访结果(随访截至2024年10月或死亡)分为预后不良组(52例)和预后良好组(146例)。统计所有患者围术期指标，术前、术后3个月的肾功能指标及随访期间的并发症，比较两组临床资料及Klotho、AAPR、SIRI,分别采用多因素logistic回归分析法和受试者工作特征曲线分析危险因素和预测价值。结果 行RLPN的肾癌患者术中出血量为(94.76±27.54)mL、术后引流量(153.65±13.54)mL、手术时间(111.76±10.65)min、肠道功能恢复时间(11.65±1.76)h、肾热缺血时间(18.65±3.76)min、住院时间(7.02±1.76) d。术前、术后3个月的肾功能指标比较，差异无统计学意义(P>0.05)。随访期间，并发症发生率为4.04%。预后不良组有肿瘤家族史、肿瘤直径>3 cm、有转移的患者占比分别为55.77%、71.15%、71.15%,高于预后良好组的39.73%、26.71%、42.47%;肾动脉阻断时间长于预后良好组(P<0.05)。相比于预后良好组，预后不良组血清Klotho、AAPR均更低，SIRI更高(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示，有转移(OR=2.385)、肾动脉阻断时间长(OR=2.032)、血清Klotho低(OR=3.102)、血清AAPR低(OR=2.442)、SIRI高(OR=2.965)是行RLPN的肾癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。将预后不良纳入阳性，预后良好纳入阴性，Klotho、AAPR、SIRI及联合检测预测行RLPN术的肾癌患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.774、0.750、0.744、0.927,灵敏度分别为73.08%、73.08%、67.31%、86.54%,特异度分别为74.66%、69.18%、71.92%、89.04%,其中联合检测的AUC最高(P<0.05)。结论 RLPN治疗肾癌的创伤较小，术后恢复较快，安全性高，且对患者肾功能无明显影响，行RLPN的肾癌患者预后不良的独立危险因素包括有转移、肾动脉阻断时间长、血清Klotho低、血清AAPR低、SIRI高，其中Klotho、AAPR、SIRI联合检测对患者预后的预测作用较高。

目的 利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系，为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具。方法 根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列，构建目的基因NLRC5的转座子质粒，将辅助质粒和转座子质粒共转染至BEAS-2B细胞。嘌呤霉素筛选稳定转导的细胞后进行单克隆化，最后对获取的单克隆细胞在分子水平上进行过表达验证。结果 成功构建一株NLRC5过表达的BEAS-2B细胞，且该细胞系可维持正常细胞活性与增殖能力。结论 通过PiggyBac转座子技术实现了NLRC5的过表达，进而提高了MHC-Ⅰ分子基因的表达。通过对该基因的过表达从而研究NLRC5对MHC-Ⅰ抗原肽提呈途径的调控机制，为理解抗病毒免疫的复杂机制以及开发新的治疗策略提供有力支持。

目的 探讨牡丹花瓣冻干极细粉(PFSP)对急性乙醇性损伤的多器官保护作用，为PFSP进一步开发成为解酒和乙醇性多器官损伤保护产品提供理论依据。方法 80只小鼠随机分成对照、模型、联苯双酯、PFSP不同剂量等共8组，每组10只。对照组与模型组小鼠灌胃等容量蒸馏水，其余组依次灌胃150 mg/kg联苯双酯和20、40、80、160、320 mg/kg PFSP,1次/d,连续10 d。于末次给药后30 min,除对照组小鼠外，其余各组灌胃为15 mL/kg的560 mL/L乙醇，建立小鼠急性肝损伤模型，8 h后摘眼球取血，取脏器。生化法检测血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性，检测肝组织匀浆甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乙醇脱氢酶(ADH)活性；胃组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性；心组织匀浆中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性；脑组织匀浆中谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)活性；并对小鼠进行了肝、胃、心、脑病理组织学观察。结果 PFSP各组小鼠血清中AST、ALT的含量均显著降低并呈现一定剂量效应(P<0.01),即随剂量增加其含量降低更明显；肝和胃系数基本处于正常水平；肝组织中TG、MDA含量明显低于模型组(P<0.05),而ADH活力和SOD含量显著高于模型组(P<0.05);除20 mg/kg的PFSP组外胃组织中GSH-Px含量显著增加且呈现一定剂量效应(P<0.01),胃组织中的CAT含量增加但不具有显著性差异；心组织中CK和LDH活力减小(P<0.05);脑组织中GSH含量升高，NO含量减少但是不具有显著性差异；肝、胃、心、脑等组织病理切片观察证实，PFSP各组与模型组相比，对水肿、炎症的改变显著。结论 PFSP具有明显防治乙醇所致小鼠急性肝、胃等损伤的作用。

目的 应用网络药理学及分子对接结合人工神经网络探讨化痰脉通片治疗H型高血压病的作用机制，探讨中医“血脉同治”的科学内涵。方法 在多个数据库中筛选化痰脉通片的中药有效成分，SwissTargetPrediction平台预测其对应靶点，GeneCards数据库筛选H型高血压病靶点，通过Venny 2.1.0取交集。采用Cytoscape软件构建“疾病-有效成分-靶点”网络，筛选核心成分；STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络图，筛选核心靶点。DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析。最后，将核心靶点的受体和核心活性成分配体进行分子对接。通过文献检索及回顾病例整理H型高血压的中医证候要素及用药规律，用Python软件构建人工神经网络方-证预测模型，探讨H型高血压痰瘀证型与化痰脉通片方药的对应关系。结果 (1)筛选出化痰脉通片96个有效成分、1 029个预测靶点，与疾病相关的成分有柚皮素、β-谷甾醇、黄芩素等；与H型高血压病的交集靶点114个，包括AKT1、IL6、TNF、IL1B、TLR4等。(2)GO功能分析主要指向(细胞)对脂多糖的反应、对缺氧的反应、炎症反应等功能，KEGG富集分析结果主要包括糖尿病并发症中的高级糖基化终末产物-受体(AGE-RAGE)信号通路、脂质和动脉粥样硬化通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化信号通路等。(3)分子对接试验显示主要活性成分与关键靶点具有很好的亲和力。(4)提取到H型高血压频次最高的证素为“痰”和“血瘀”,收集到化痰脉通片中药频数依次为：天麻91次、半夏89次、白术70次、地龙24次、石菖蒲17次、橘红13次、水蛭13次、远志9次、郁金8次、胆南星3次、僵蚕2次。(5)基于多层感知器构建方-证对应预测模型，模型化痰脉通片-痰，准确度为0.81,化痰脉通片-血瘀，准确度为0.75。结论 化痰脉通片主要针对H型高血压病痰瘀互结证型，并通过柚皮素、β-谷甾醇、黄芩素等作用于多靶点，降低机体氧化应激和炎症反应水平，调控AGE-RAGE信号通路、脂质和动脉粥样硬化等通路，发挥治疗H型高血压病的作用。

目的 探索程序性坏死关键分子混合谱系激酶域样假激酶（MLKL）在小鼠高原脑水肿（HACE）中的作用。方法 使用成年雄性C57BL/6 WT小鼠和MLKL^-/-小鼠，将小鼠分为3组，分别为对照组、WT HACE组和MLKL^-/- HACE组，每组8只。将小鼠放进小型高低压氧舱，调整海拔至5 500 m,暴露72 h,建立HACE模型。使用Western blotting检测MLKL蛋白的表达。采用脑含水量指数评估脑水肿发生的程度。采用伊文思蓝检测血脑屏障开放状态。通过免疫荧光染色检测MLKL及水通道蛋白4（AQP4）在血管的分布，免疫球蛋白IgG的渗透。应用新物体识别实验分析小鼠认知功能。结果 小鼠在5 500 m下暴露72 h可导致血脑屏障破坏，脑含水量升高（P<0.01）,新物体识别能力下降（P<0.01）,MLKL及pMLKL表达升高（P<0.05）,pMLKL与AQP4、CD31免疫荧光共标结果成点状聚集体。MLKL^-/-小鼠在同等刺激下呈现出较低程度的HACE,表现为MLKL^-/- HACE组小鼠较WT HACE组小鼠脑水含量显著减少（P<0.05）,血脑屏障开放程度降低，免疫球蛋白从血管中的渗出减少，新物体识别功能改善（P<0.05）。结论 程序性坏死关键分子MLKL参与HACE的发生与发展，敲除MLKL可减轻HACE。