目的 探究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷（AICAR）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法 A549细胞分为对照组（Control组）、AICAR组、AICAR+ov-NC组和AICAR+ov-HSPA6组。CCK-8实验检测细胞的增殖活性；Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。基于GEO数据库分析AICAR处理后肺癌细胞中的差异表达基因；RT-qPCR和Western blot检测细胞中HSPA6表达水平。将A549细胞皮下注射裸鼠，待移植瘤体积达100 mm³时，将裸鼠随机分为对照组和AICAR组，免疫组织化学方法检测移植瘤中Ki-67的表达。结果 AICAR处理抑制A549细胞体外增殖、迁移和侵袭，AICAR还抑制A549细胞移植瘤体内肿瘤生长并降低移植瘤中Ki-67表达。HSPA6是基于生物信息学筛选的AICAR处理后肺癌细胞中的差异表达基因。过表达HSPA6部分逆转AICAR对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 AICAR抑制NSCLC A549细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内肿瘤生长，其机制可能与下调HSPA6表达有关。