目的 鉴定肠道病毒C组96型(enterovirus C96,EV-C96)VP1蛋白的线性B细胞表位。方法 采用IEDB网站提供的在线分析工具分析、预测EV-C96 VP1蛋白的线性B细胞表位，结合其二级结构、β-转角、抗原性、亲水性等多项参数，筛选出优势候选表位；应用间接ELISA法检测候选表位与EV-C96免疫血清的反应性以及与21种其他常见手足口病病原血清的交叉反应性；应用微量中和试验测定表位抗体的中和效价；采用序列比对分析表位的序列保守性；应用结构对齐分析表位的结构特异性。结果 通过生物信息学筛选出EV-C96 VP1蛋白7个候选表位(P1～P7);ELISA法检测发现P7(氨基酸序列位置为282～304)与EV-C96多克隆抗体有强反应性，与其他常见EV多克隆抗体不发生明显反应；微量中和试验显示，P7抗体的中和效价低于1∶2;序列及结构分析结果显示，P7的氨基酸序列在EV-C96型内具有较高保守性，与其他EV相应位点氨基酸序列的结构有明显差异。结论 P7表位为EV-C96特异的非中和性B细胞表位，可作为开发EV-C96检测试剂盒的候选抗原表位。