Wnt1-Cre和Pax2-Cre标记的小鼠第一鳃弓颅颌面部神经嵴细胞异质性研究

徐珏, 刘双, 符宏高, 邵美瑛, 陈美玲, 黄镇

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华西口腔医学杂志 ›› 2024, Vol. 42 ›› Issue (04) : 435-443.

Wnt1-Cre和Pax2-Cre标记的小鼠第一鳃弓颅颌面部神经嵴细胞异质性研究

  • 徐珏, 刘双, 符宏高, 邵美瑛, 陈美玲, 黄镇
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摘要

目的 利用Wnt1-Cre和Pax2-Cre小鼠特异性标记颅颌面神经嵴细胞(CNCs)迁移到第一鳃弓时的分化异质性及机制。方法 分别收取胚胎期(E) 8.0~E9.25 Wnt1-Cre;R26RmTmG及Pax2-Cre;R26RmTmG小鼠胚胎进行整体荧光观察,利用石蜡切片免疫荧光对E15.5的Pax2-Cre;R26RAi9和Wnt1-Cre;R26RAi9小鼠所标记的CNCs在颅面部主要组织器官中的谱系分化情况进行比较分析,最后对E10.5的Wnt1-Cre;R26RmTmG和Pax2-Cre;R26RmTmG小鼠的第一鳃弓组织中CNCs进行单细胞测序分析,并对差异基因进行荧光定量聚合酶链反应(q-PCR)验证。结果 Pax2-Cre和Wnt1-Cre小鼠特异性标记的CNCs均在E8.0自神经板开始迁移,但Pax2-Cre小鼠仅标记迁移到第一鳃弓的CNCs,而Wnt1-Cre同时标记了迁移到第一和第二鳃弓的CNCs;在分化谱系示踪方面,二者皆标记了CNCs分化形成的颅颌面部组织器官的间充质,但Wnt1-Cre在上腭和舌中标记CNCs更多;在第一鳃弓间充质中,Pax2-Cre所标记的CNCs特异性表达基因主要参与了成骨,而Wnt1-Cre所标记的CNCs特异性表达基因主要参与了肢体发育、细胞迁移和成骨,q-PCR结果也证实了两者高表达差异基因参与了以上功能。结论 本研究结果提示Pax2-Cre小鼠可特异性用于第一鳃弓CNCs及其衍生组织成骨方面的研究。

关键词

颅颌面部神经嵴细胞 / 第一鳃弓 / Wnt1-Cre / Pax2-Cre / 单细胞测序

中图分类号

R782

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徐珏, 刘双, 符宏高, 邵美瑛, 陈美玲, 黄镇. Wnt1-Cre和Pax2-Cre标记的小鼠第一鳃弓颅颌面部神经嵴细胞异质性研究. 华西口腔医学杂志. 2024, 42(04): 435-443

基金

国家自然科学基金面上项目(82170918); 四川省自然科学基金(2024NSFSC0549)

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