目的：采用16S rDNA测序技术分析酒精性脂肪肝病（AFLD）发展过程中小鼠肠道菌群的变化，并探讨小鼠AFLD进展的可能机制。方法：将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（35只）和模型组（25只）。适应性喂养5 d后，对照组小鼠每天喂食Lieber-DeCarli对照流质饲料（TP4030C），模型组小鼠每天喂食含有4%乙醇的Lieber-DeCarli流质饲料（TP4030B），连续30 d后，采用苏木精—伊红（HE）染色法观察肝脏病理变化；16S rDNA测序法分析肠道菌群组成结构。结果：与对照组相比，AFLD模型组小鼠肠道菌群的α多样性结果显示其物种丰富度降低（P<0.05）。Beta多样性结果表明两组小鼠肠道菌群结构组成和丰度存在显著差异（P<0.05）。与对照组相比，模型组粪杆菌属（Faecalibaculum）、杜博菌属（Dubosiella）、异杆菌属（Allobaculum）、瘤胃球菌属UCG-013(Ruminococcaceae UCG-013)等菌属相对丰度升高，乳酸杆菌属（Lactobacillus）、毛螺菌属（Lachnospiraceae NK4A136 group）等菌属相对丰度降低。模型组小鼠肠道菌群在丙氨酸转移酶、谷胱甘肽水解酶和组蛋白乙酰转移酶通路活性显著增加（P<0.05）。结论：含4%乙醇的Lieber-DeCarli流质饲料成功构建了AFLD C57BL/6小鼠模型，AFLD小鼠肠道菌群的结构和组成均发生变化，酒精可能通过破坏肠道微生物稳态，增加丙氨酸转移酶、谷胱甘肽水解酶和组蛋白乙酰转移酶通路活性加快AFLD的进展。