穿心莲ApbHLH80基因克隆及表达分析

张洪波, 钟楚, 闫志刚

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广西医科大学学报 ›› 2024, Vol. 41 ›› Issue (05) : 668-675. DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2024.05.005

穿心莲ApbHLH80基因克隆及表达分析

  • 张洪波, 钟楚, 闫志刚
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摘要

目的:克隆穿心莲转录因子ApbHLH80基因,并对其进行生物信息学分析和表达分析。方法:根据穿心莲转录组数据库设计引物,采用PCR扩增等方法克隆ApbHLH80全长序列,使用生物信息学在线分析工具,分析和预测该基因编码蛋白的理化性质,采用实时荧光定量PCR分析该基因在茉莉酸甲酯处理下的表达模式,并采用高效液相色谱法测定穿心莲内酯含量。结果:生物信息学分析表明,该基因开放阅读框长度包含1 095 bp,共编码364个氨基酸;该基因的氨基酸序列分子量约为39.96 ku,理论等电点为5.73,无信号肽和无跨膜结构,属亲水性核蛋白;该蛋白与苏麻、丹参、一串红和芡欧鼠尾草等物种亲缘关系较为接近,都具有b HLH_AtbHLH_like保守结构域。实时荧光定量PCR分析结果表明,ApbHLH80的表达量在叶片中最高,并且响应茉莉酸甲酯的诱导,其表达模式与穿心莲内酯合成存在密切联系。结论:成功克隆得到的ApbHLH80基因可能参与调控穿心莲内酯合成,为进一步探讨其潜在的调控作用提供理论支撑。

关键词

穿心莲 / ApbHLH80基因 / 基因克隆 / 生物信息学 / 表达分析

中图分类号

S567.219

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张洪波, 钟楚, 闫志刚. 穿心莲ApbHLH80基因克隆及表达分析. 广西医科大学学报. 2024, 41(05): 668-675 https://doi.org/10.16190/j.cnki.45-1211/r.2024.05.005

基金

国家自然科学基金资助项目(No.82260744); 广西自然科学基金资助项目(No.GXNSFAA2022035524;No.2021GXNSFBA220011); 广西药用资源保护与遗传改良重点实验室资助项目(No.KL2020ZZ05;No.KL2020ZZ03)

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