目的：探讨柴胡疏肝散与二甲双胍联合使用对2型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠的作用效果，并探究其可能的作用机制。方法：随机选择10只作为正常对照（control）组，使用普通饲料进行喂养；通过饲喂高糖高脂饲料和静脉注射链脲佐菌素构建了T2DM合并NAFLD(T2DM-NAFLD)大鼠模型；40只T2DM-NAFLD大鼠随机分为模型组（model组）、柴胡疏肝散组（CHSG组）、二甲双胍组（MET组）、联合用药组（MET+CHSG组），每组10只。control组和model组大鼠用等体积生理盐水灌胃，持续14周。采用试剂盒检测血清和肝脏组织中白介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血糖、胰岛素、瘦素、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和抗氧化酶（SOD）的水平；采用苏木精—伊红染色和油红O染色检测肝组织病理损伤；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ACC、FAS、SREBP-1c、PPARα基因的表达；采用蛋白质免疫印迹分析检测肝组织中Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白的表达。结果：与control组相比，model组大鼠的体重、血清HDL-C水平、PPARα和LPL mRNA表达、肝脏组织GS和SOD活性、核Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著降低，而肝脏重量，血清空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TC和TG、IL-6、TNF-α水平，以及肝脏组织SREBP-1c、ACC、FAS、IL-6、TNF-α和NF-κB表达，肝脏组织PEPCK和G6Pase活性，肝脏组织ROS和MDA水平均显著升高（P<0.05）。与model组相比，CHSG组、MET组、MET+CHSG组大鼠的体重、血清HDL-C水平、肝脏组织GS和SOD活性、核Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著升高，且MET+CHSG组显著高于CHSG组和MET组（P<0.05）。与model组相比，CHSG组、MET组、MET+CHSG组大鼠肝脏重量，血清空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TC和TG、IL-6、TNF-α水平，以及肝脏组织SREBP-1c、ACC和FAS、IL-6、TNF-α和NF-κB mRNA表达水平，肝脏组织PEPCK和G6Pase活性，肝脏组织ROS和MDA水平均显著降低（P<0.05），且MET+CHSG组显著低于CHSG组和MET组（P<0.05）。结论：柴胡疏肝散联合二甲双胍对T2DM-NAFLD大鼠具有护肝作用，其机制可能与Nrf2/HO-1抗氧化信号通路有关。