目的：通过网络药理学分析预测泽泻醇B作用于鼻咽癌的相关靶点和通路，探究作用机制并通过实验进行验证。方法：通过Pubchem、Pharmmapper、GeneCards等数据库搜索并获得泽泻醇B对鼻咽癌和EB病毒的相关作用靶点，并取得它们之间的交集靶点，之后运用Cytoscape软件构建出“药物—靶点—疾病—通路”关系网络，最后采用David数据库对靶点进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。CCK-8法及平板克隆实验检测泽泻醇B对鼻咽癌CNE-2细胞株在不同浓度的条件下的增殖抑制情况。Western blotting对预测出的通路靶点蛋白的表达进行验证。结果：网络药理学研究结果显示，泽泻醇B抗鼻咽癌的潜在作用靶点共有71个，根据degree值从高到低排列筛选出相关性最强的10个靶点。GO功能注释得到分子功能条目544个，按照P值升序排列结果得到前15条显著富集的条目。KEGG分析显示与PI3KAkt信号通路密切相关；涉及的关键基因包括Akt1、MAPK1、HSP90AA1、MAPK14等。CCK-8及平板克隆实验的结果显示，泽泻醇B能有效地抑制鼻咽癌细胞增殖，并且抑制效果随着药物作用时间延长与药物浓度的增加而增强，western blotting实验结果显示，泽泻醇B可明显下调Akt蛋白和PI3K蛋白表达水平（P<0.05）。结论：泽泻醇B可以有效地抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖，其抗鼻咽癌机制可能与抑制PI3K-Akt信号通路活性有关。