目的：探索硝石雄黄散对血管内皮细胞缺氧损伤的保护机制。方法：采用Griess法检测中药硝石（XS）、雄黄（XH）、硝石雄黄散（XSXH）中硝酸盐（NO₃^-）和亚硝酸盐（NO₂^-）含量及各组小鼠血清一氧化氮（NO）水平；制备硝石雄黄散各组分药的小鼠血清，将人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）随机分为空白（Blank）组、缺氧（Hypoxia）组、Hypoxia+XS组、Hypoxia+XH组和Hypoxia+XSXH组，Blank常氧处理，其余组别予缺氧24 h制备细胞缺氧模型；利用小鼠血清干预HCAEC，采用四甲基罗丹明甲酯（TMRM）和线粒体超氧化物指示剂（MitoSox）检测各组HCAEC线粒体膜电位及活性氧（ROS）水平；Griess法检测各组HCAEC中NO水平及ELISA法检测ET-1、IL-6和TNF-α水平。结果：XSXH组NO₂^-含量高于XS组而NO₃^-含量较XS组低（P<0.001）,XH组NO₃^-和NO₂^-含量最低（P<0.001,P<0.01）；与Blank组相比，XS组、XH组和XSXH组均能提高小鼠血清NO水平（P<0.05,P<0.01,P<0.001）；细胞结果显示，Hypoxia组能显著降低细胞NO生物活性、升高ET-1和炎症因子（IL-6、TNF-α）水平、线粒体膜电位降低及生成大量ROS（P<0.001）；与Hypoxia组相比，Hypoxia+XS组、Hypoxia+XH组和Hypoxia+XSXH组对上述指标均有明显改善（P<0.05,P<0.01,P<0.001），其中Hypoxia+XSXH组作用最强，Hypoxia+XS组强于Hypoxia+XH组（P<0.05）。结论：XS、XH和XSXH均能不同程度地提高NO生物活性，通过降低ET-1水平和炎症因子水平，恢复细胞线粒体膜电位以及减少ROS生成来保护血管内皮细胞缺氧损伤，其中XSXH作用最强。