目的：建立金花三叶降糖颗粒中藤茶、荷叶、木姜叶柯薄层鉴别及二氢杨梅素、根皮苷、杨梅素含量测定方法，为金花三叶降糖颗粒的质量控制提供一定的依据。方法：采用薄层色谱法（TLC）对金花三叶降糖颗粒中的藤茶、荷叶、木姜叶柯三味药材进行薄层鉴别研究，采用高效液相色谱法（HPLC）测定金花三叶降糖颗粒中有效成分二氢杨梅素、根皮苷、杨梅素的含量。结果：藤茶、荷叶、木姜叶柯薄层鉴别特征斑点清晰，分离度较好，且阴性无干扰；二氢杨梅素在0.124 5～1.245 mg/mL(r=0.998 9)浓度范围内呈良好的线性关系，平均回收率为98.37%,RSD为1.24%；根皮苷在0.027 5～0.275 0 mg/mL(r=0.999 9)浓度范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.70%,RSD为0.73%；杨梅素在0.029 2～0.292 1 mg/mL(r=0.999 6)浓度范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.02%,RSD为1.49%。结论：该方法准确便捷，重现性良好，可用于金花三叶降糖颗粒的质量控制。