目的：探讨氯胺酮通过p38 MAPK信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响。方法：以乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象，根据细胞培养基添加氯胺酮和p38 MAPK抑制剂（SB203580）分为4组：control组（无氯胺酮和SB203580）、氯胺酮组（10μg/mL）、SB203580组（20μmol/L）、氯胺酮+SB203580组（氯胺酮10μg/mL+SB203580 20μmol/L）；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中p38 MAPK磷酸化水平；克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力；Transwell侵袭实验检测各组细胞的趋化运动能力和侵袭能力；细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力；RT-qPCR和Western blotting法检测各组细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结果：与control组相比，氯胺酮组和SB203580组均能降低p38 MAPK磷酸化水平（P<0.05）以及抑制MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力（P<0.001或P<0.05），而与氯胺酮组或SB203580组相比，氯胺酮+SB203580组p38 MAPK磷酸化水平均降低（P<0.001），同时MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力降低（P<0.001）；与control组相比，氯胺酮组和SB203580组中MDA-MB-231细胞迁移超出划痕部分减少（P<0.05），而与氯胺酮组或SB203580组相比，氯胺酮+SB203580组划痕距离均变宽（P<0.001）；与control组相比，氯胺酮组和SB203580组MDA-MB-231细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达降低（P<0.05），与氯胺酮组或SB203580组相比，氯胺酮+SB203580组MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达均降低（均P<0.001）。结论：氯胺酮通过抑制p38 MAPK信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭与迁移。