目的：应用网络药理学探讨聚精活血汤治疗弱精子症的作用机制，为其临床应用提供新的研究思路。方法：通过网络药理学数据库TCMSP、PubChem、SwissTargetPrediction获得聚精活血汤组成药物的活性成分及靶点；由GeneCards、DisGeNET、OMIM数据库中获得弱精子症相关靶点，将二者靶点取交集后获得共有靶点；利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析；应用STRING在线数据库构建共有靶点蛋白互作网络(PPI)分析。结果：共筛选出201个聚精活血汤主要活性成分，包括谷甾醇(sitosterol)、豆甾醇(stigmasterol)、β-谷甾醇(beta-sitosterol)、木犀草素(luteolin)、丝氨酸蛋白酶等482个药物靶基因，726个疾病靶基因，取交集后得到65个共有靶基因，核心靶基因为TP53、IL6、TNF、CASP3、IL1B、MYC等；KEGG通路富集分析得到115个条目，主要为癌症通路、IL-17信号通路、PI3K-Akt信号通路等。结论：聚精活血汤通过多成分、多靶点、多通路协同调控并治疗弱精子症，为临床研究及应用提供依据。