为分析承冀北区不同养殖场中致奶/肉犊牛腹泻大肠杆菌致病性、血清型、毒力基因及耐药情况等生物学特征。于2022—2023年采集冀北地区患腹泻病犊牛（0～2月龄）的病料组织样本（粪便、肛拭子及肝脏）120份,其病毒性病原和寄生虫性病原的检测为阴性,采用细菌分离培养、形态观察、生化鉴定及PCR方法对大肠杆菌进行鉴定,采用小鼠毒力试验、玻板凝集试验、PCR法及K-B药敏纸片法分别检测致病性、血清分型、毒力基因及耐药性,并测定优势血清型代表株对小鼠的半数致死量(LD₅₀)。结果显示,分离得到76株大肠杆菌,56株可以引起小鼠不同程度死亡为致病性大肠杆菌,死亡率在均在40%以上;56株致病性大肠杆菌中以O6和O152为主要流行的优势致病血清型,其中肠产毒性大肠杆菌（ETEC） 48株（85.7%）、肠致病性大肠杆菌（EPEC）6株（10.7%）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）2株（3.6%）;毒力基因fyuA、irp2、fliC、stx1、stx2、K88、K 99、eaeA和ler检测率在50%以上,其他类型的毒力基因检测率为3.6%～37.0%,对氨苄西林、新霉素、阿莫西林等9种药物耐药率在42.9%以上,对其他药物耐药率为12.5%～32.1%,呈现多重耐药性,且至少耐3类抗菌药物,优势血清型代表株的ETO152株和EPO6株的LD₅₀分别为3.45×10～4和3.12×10～6 CFU/mL。本研究可为冀北地区奶/肉犊牛大肠杆菌病的防控提供参考。