传染性喉气管炎病毒RAA检测方法的建立

冯婉莹, 王转转, 刘一宁, 陈光明, 郭霄慧, 李伟欣, 李卫晴, 张志强, 李佩国, 张召兴, 吴同垒, 贾青辉

PDF(4075 KB)
PDF(4075 KB)
中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (02) : 212-218. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.02.06

传染性喉气管炎病毒RAA检测方法的建立

  • 冯婉莹, 王转转, 刘一宁, 陈光明, 郭霄慧, 李伟欣, 李卫晴, 张志强, 李佩国, 张召兴, 吴同垒, 贾青辉
作者信息 +
History +

摘要

为建立一种快速、高效、灵敏的传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)检测方法。提取ILTV的DNA作为模板,通过条件优化、敏感性和重复性分析,建立针对ILTV的重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法,同时使用禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)、传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的核酸进行检测,验证此方法的特异性;最后利用此方法对采集自河北省多家规模化养鸡场的59份临床样本进行检测,并与国家标准中的实时荧光定量(qPCR)和PCR方法进行对比分析。结果显示,本研究建立的RAA检测方法,其反应体系为缓冲液25.0μL、引物2.1μL、探针0.6μL、乙酸镁5.0μL、模板5.0μL,反应温度为39℃,扩增时间为20 min以内;该方法的灵敏度为10~1 copies/μL,特异性检测100%;对59份临床样本检测结果显示,RAA荧光法与qPCR法均检出17份阳性,PCR法检出12份,RAA(荧光法)检出率与实时荧光定量与qPCR一致,高于PCR检测法。结果表明:RAA荧光法检测时间短,并有较好的特异性与灵敏度,可用于ILTV的快速检测。

关键词

传染性喉气管炎 / 重组酶 / RAA

中图分类号

S852.65

引用本文

导出引用
冯婉莹, 王转转, 刘一宁, 陈光明, 郭霄慧, 李伟欣, 李卫晴, 张志强, 李佩国, 张召兴, 吴同垒, 贾青辉. 传染性喉气管炎病毒RAA检测方法的建立. 中国兽医学报. 2025, 45(02): 212-218 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.02.06

基金

河北省重点研发计划资助项目(21326614D); 河北省现代农业产业体系蛋禽创新团队资助项目(HBCT2024260209); 河北省现代农业产业体系肉禽创新团队资助项目(HBCT2024270207)

评论

PDF(4075 KB)

Accesses

Citation

Detail

段落导航
相关文章

/