空肠弯曲菌RPA-LFD快速检测方法的建立及评价

叶景芬, 武绍碧, 陈世雄, 龙宥茨, 廖怡雯, 罗雪, 杨琦

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (12) : 2579-2584. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.12.11

空肠弯曲菌RPA-LFD快速检测方法的建立及评价

  • 叶景芬, 武绍碧, 陈世雄, 龙宥茨, 廖怡雯, 罗雪, 杨琦
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摘要

为建立特异、快速、便捷的空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni)检测方法,以空肠弯曲菌的hip0基因为靶标,设计了1组特异性引物及1条探针,下游引物和探针的5′端分别标记生物素、荧光素,通过对反应时间及温度的优化,建立了C.jejuni-RPA-LFD检测方法,并对其进行了灵敏度评估及模拟样本检测。结果显示,C.jejuni-RPA-LFD与肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、假单胞菌、蜡样芽胞杆菌、巴氏杆菌、奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门菌无交叉反应,最佳反应体系为37℃、25 min,其灵敏度可达3.93×10~0拷贝/μL,模拟检测中,可检测出1×10~2 CFU/mL的空肠弯曲菌污染粪便样本。结果表明,建立的C.jejuni-RPA-LFD具有特异性好、简便、快速、灵敏度高等优点,为畜禽养殖业基层现场、快速诊断空肠弯曲菌及控制其传播提供有效途径。

关键词

空肠弯曲菌 / RPA-LFD / hipO基因

中图分类号

S852.61

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叶景芬, 武绍碧, 陈世雄, 龙宥茨, 廖怡雯, 罗雪, 杨琦. 空肠弯曲菌RPA-LFD快速检测方法的建立及评价. 中国兽医学报. 2024, 44(12): 2579-2584 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.12.11

基金

国家自然科学基金资助项目(32260884)

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