猪轮状病毒RT-RAA-LFD快速诊断方法的建立及应用

罗晓莹, 林福忠, 林秋娟, 曾彦钦, 陈震, 施文豪

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (12) : 2534-2539. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.12.05

猪轮状病毒RT-RAA-LFD快速诊断方法的建立及应用

  • 罗晓莹, 林福忠, 林秋娟, 曾彦钦, 陈震, 施文豪
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摘要

为实现猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)的快速检测,本研究将重组酶聚合酶等温扩增(recombinase aided amplification, RAA)与侧流层析试纸条(lateral flow dipstick, LFD)技术结合,根据PoRV VP6基因保守序列,设计特异性引物和探针,构建并优化扩增体系,建立了基于RAA-LFD的PoRV一步法快速检测方法,并对检验该方法的特异性、敏感性、重复性及临床应用进行了评价。结果显示,该方法在37℃恒温反应15 min即可实现对PoRV核酸的扩增,最低检出限为22.3拷贝/μL,与其他常见病毒性腹泻病毒均无交叉反应,RT-RAA-LFD与RT-PCR检测方法总符合率为97.0%,Kappa系数为0.93(K>0.75)。本试验建立的RT-RAA-LFD检测方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,并具备快速、可视化和适合现场快检等特点,为PoRV快速诊断和流行病学调查提供了新的技术手段。

关键词

猪轮状病毒 / 重组酶聚合酶等温扩增 / 侧流层析试纸条 / 检测方法

中图分类号

S852.651

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罗晓莹, 林福忠, 林秋娟, 曾彦钦, 陈震, 施文豪. 猪轮状病毒RT-RAA-LFD快速诊断方法的建立及应用. 中国兽医学报. 2024, 44(12): 2534-2539 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.12.05

基金

福州市科技计划市属农科院所科研专项资助项目(2023-N-008)

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