采用微量法对10株西藏牦牛源牛支原体进行了大环内酯类抗生素的药物敏感性试验，并对敏感株进行了体外高度耐药株的诱导，对敏感株、耐药株和体外高度耐药株进行了靶位基因突变分析，甲基化酶基因、钝化酶基因以及药物主动外排系统的检测，以揭示大环内酯类药物耐药机制。结果显示：10株牛支原体对大环内酯类抗生素均存在不同程度的耐药性，但经过甲基化酶和钝化酶基因检测分析，发现均不存在甲基化酶基因编码的甲基化酶和大环内酯类钝化酶介导的耐药机制，说明敏感株和耐药株的靶位基因位点均未发生突变；而体外高度耐药株在Domain-Ⅱ、L22和L4靶位基因位点发生了突变，从而说明若存在2个及2个以上靶位基因氨基酸位点发生突变，则可产生高度耐药株；经过主动外排系统检测，发现均不存在以大环内酯类抗生素为底物的主动外排系统。由此可见，西藏牦牛源牛支原体在大环内酯类药物高浓度的压力下，菌株容易发生突变，且存在2个及2个以上靶位基因氨基酸位点发生突变，则容易产生高度耐药株。