Sirt1在氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤中的保护作用

张宇飞, 周博文, 程薪同, 付守鹏, 柳巨雄, 郭文晋

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (05) : 1000-1007. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.05.19

Sirt1在氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤中的保护作用

  • 张宇飞, 周博文, 程薪同, 付守鹏, 柳巨雄, 郭文晋
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摘要

旨在初步阐明Sirt1在奶牛乳腺氧化应激中对紧密连接的影响及机制。以奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)为研究对象,使用H_2O_2诱导细胞氧化应激构建细胞模型,添加Sirt1激动剂SRT 2104,使用流式细胞术检测细胞中活性氧的含量;通过RT-PCR检测Sirt1基因的转录水平;用Western blot检测Sirt1、ZO-1、Occludin、Cludin 3、p38MAPK、JNK、MLCK、MLC2的蛋白表达水平;通过细胞免疫荧光检测ZO-1、Occludin、Cludin 3的表达;同时使用试剂盒检测细胞的抗氧化能力。结果表明,H_2O_2刺激会显著抑制MAC-T细胞活性并抑制Sirt1基因的表达以及Sirt1、ZO-1、Occludin和Cludin 3的蛋白表达;SRT 2104可以有效改善H_2O_2刺激导致的ZO-1、Occludin和Cludin 3的蛋白表达下降;同时SRT 2104会增强细胞的抗氧化能力并抑制p38MAPK、JNK、MLCK蛋白的表达和MLC2的磷酸化。以上结果表明Sirt1通过抑制p38MAPK/JNK信号传导途径增强细胞的抗氧化能力和紧密连接蛋白表达。

关键词

Sirt1 / 奶牛乳腺上皮细胞 / 紧密连接 / p38MAPK / JNK

中图分类号

S823

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张宇飞, 周博文, 程薪同, 付守鹏, 柳巨雄, 郭文晋. Sirt1在氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤中的保护作用. 中国兽医学报. 2024, 44(05): 1000-1007 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.05.19

基金

国家自然科学基金资助项目(32102624,32372961); 重庆市自然科学基金资助项目(CSTB2022NSCQ-MSX0920)

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