对2020-2022年分离自我国陕西省、甘肃省和宁夏回族自治区的30株D型产气荚膜梭菌进行毒素基因鉴定、耐药性检测、消毒剂敏感性测试和菌株遗传特征分析。毒素基因鉴定显示分离菌株均携带毒素基因cpa和etx,不携带其他分型相关毒素基因。分离菌株对磺胺异噁唑和复方新诺明抗性较强，耐药率分别为30.00%和63.33%;对青霉素、利奈唑胺、克林霉素、多西环素、恩诺沙星、氟苯尼考敏感，MIC值集中于1 mg/L以下。分离菌株经推荐使用浓度的新洁尔灭、乙醇、84消毒液和浓戊二醛处理10 min后，均可被完全杀灭。经多位点序列分析(MLST),30株D型产气荚膜梭菌中共发现7种不同的管家基因组合；同场区和同省(区)来源的菌株间有相同的管家基因组合和更近的进化关系，并且陕西省和甘肃省的部分菌株间也有相同管家基因组合，揭示了D型产气荚膜梭菌在羊场内部和不同省份之间的传播。综上，本研究在一定程度上在基因水平揭示了D型产气荚膜梭菌的地域性流行和传播，提示在生产中应加强对消毒剂和抗生素的合理使用，以减少D型产气荚膜梭菌的传播。