2种饲养层对牛iPSCs从始发态向初始态转化的影响

陈斓歆, 姜禹, 杨蕊, 朱春玲, 张博洋, 王玥琦, 张言, 赵彦森, 唐博, 张学明

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (02) : 335-340+355. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.02.17

2种饲养层对牛iPSCs从始发态向初始态转化的影响

  • 陈斓歆, 姜禹, 杨蕊, 朱春玲, 张博洋, 王玥琦, 张言, 赵彦森, 唐博, 张学明
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摘要

饲养层细胞对获得多能干细胞(pluripotent stem cells, PSCs)非常重要,小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEF)已被广泛用作培养和产生多种胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)及诱导PSCs(induced PSCs, iPSCs)的饲养层,但由于种间差异,MEF可能不适于家畜ESCs和iPSCs。研究表明,PSCs可被分为至少2种多能性状态:初始态(naive state)和始发态(primed state)。本室前期用MEF饲养层从牛睾丸支持细胞(sertoli cells, SCs)获得了牛的始发态iPSCs。本研究基于初始态培养液(na6ve medium, NM),比较了MEF饲养层和牛胚胎成纤维细胞(bovine embryonic fibroblasts, BEF)饲养层对牛iPSCs多能性和形态维持及其从始发态向初始态样转化的影响。结果显示,MEF+NM(MNM)和BEF+NM(BNM)均能在3~4 d内将牛iPSCs从始发态转化为初始样状态。克隆分析显示,BNM培养中牛iPSCs的克隆数、碱性磷酸酶活性和转化效率均高于MNM培养中的指标。这些克隆在长期培养中均能表达初始态iPSCs的多能性分子标记。结果表明,采用NM条件,在MEF和BEF饲养层上均可产生牛初始态样iPSCs,但在BEF上转化效率较高。

关键词

/ 牛胚胎成纤维细胞 / 诱导多能干细胞 / 小鼠胚胎成纤维细胞 / 初始态 / 始发态

中图分类号

S823

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陈斓歆, 姜禹, 杨蕊, 朱春玲, 张博洋, 王玥琦, 张言, 赵彦森, 唐博, 张学明. 2种饲养层对牛iPSCs从始发态向初始态转化的影响. 中国兽医学报. 2024, 44(02): 335-340+355 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.02.17

基金

国家自然科学基金资助项目(32172803,31872434); 广东省清远市科技计划资助项目(2018A018)

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