猪轮状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及初步应用

林正丹, 涂军, 詹存林, 孙秀秀, 冯贺龙, 刘茜, 胡薛英, 谷长勤, 张万坡, 陶攀, 陈品, 余腾, 钱平, 程国富

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中国兽医学报 ›› 2024, Vol. 44 ›› Issue (02) : 244-248. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.02.04

猪轮状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及初步应用

  • 林正丹, 涂军, 詹存林, 孙秀秀, 冯贺龙, 刘茜, 胡薛英, 谷长勤, 张万坡, 陶攀, 陈品, 余腾, 钱平, 程国富
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摘要

为了对早期猪轮状病毒(porcine rotavirus, PoRV)感染情况进行监测,根据GenBank中已有的A型PoRV VP6序列,设计2对引物和荧光定量探针,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR方法,并对该方法特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果显示所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法特异性强、重复性好、灵敏度高,可检测到10~1拷贝/μL。经对2 366份腹泻仔猪的粪便样品进行检测,所建立的方法检出率(5.92%,140/2 366)高于常规RT-PCR(4.95%,117/2 366),两者的符合率为98.58%。结果表明,本研究建立的PoRV TaqMan荧光定量RT-PCR方法可用于猪轮状病毒病的临床检测。

关键词

猪轮状病毒 / TaqMan探针 / 荧光定量RT-PCR方法

中图分类号

S852.65

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林正丹, 涂军, 詹存林, 孙秀秀, 冯贺龙, 刘茜, 胡薛英, 谷长勤, 张万坡, 陶攀, 陈品, 余腾, 钱平, 程国富. 猪轮状病毒TaqMan荧光定量检测方法的建立及初步应用. 中国兽医学报. 2024, 44(02): 244-248 https://doi.org/10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.02.04

基金

中央高校基本科研业务费专项基金资助项目(140422008); 扬翔股份有限公司重大创新变革基金资助项目(JYKJ-R&D2022-01)

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