不同转染试剂对制备CAR-T细胞的病毒包装效果比较

徐丹丹, 金国良, 宋晶园, 郑骏年

徐州医科大学学报 ›› 2018, Vol. 38 ›› Issue (03) : 186-190.

不同转染试剂对制备CAR-T细胞的病毒包装效果比较

  • 徐丹丹, 金国良, 宋晶园, 郑骏年
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摘要

目的 为提高制备嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)的病毒包装滴度,比较并确定有效的病毒包装转染试剂。方法 应用氯化钙(CaCl2)、TransintroTM EL、脂质体Lip2000三种质粒转染试剂对逆转录病毒载体质粒MSCV-IRES-GFP(MIG1)、含嵌合抗原受体(CAR)及HA标签的逆转录病毒载体质粒MSCV-IRES(MIG2)、真核表达质粒pIRES2EGFP-DDR1 (PDDR1)进行转染,荧光显微镜观察、流式细胞检测上述试剂的转染效率。结果 TransintroTM EL均获得相对较高的转染效率,对MIG1为(43.90±0.57)%,对MIG2为(42.80±0.57)%,对PDDR1为(58.90±0.71)%。而脂质体Lip2000的转染效率均相对较低,对MIG1为(5.20±0.42)%,对MIG2为(9.75±0.07)%,对PDDR1为(22.4±0.28)%。CaCl2在同一转染体系下对不同质粒转染效果不同。结论 对于制备CAR-T细胞的病毒包装,TransintroTM EL试剂能够稳定获得较高的转染效率。

关键词

病毒包装 / 转染试剂 / 293T细胞

中图分类号

R730.51

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徐丹丹, 金国良, 宋晶园, 郑骏年. 不同转染试剂对制备CAR-T细胞的病毒包装效果比较. 徐州医科大学学报. 2018, 38(03): 186-190

基金

江苏省六大人才高峰项目(2015-WSW-056); 江苏省博士后科研资助计划(1501060A); 江苏省高校优秀中青年教师和校长赴境外研修项目

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