壳聚糖纳米粒基因载体的制备和体外转染实验研究

王红梅, 肖玉洁, 韩正祥, 高向阳, 裴冬生, 杜秀平

徐州医科大学学报 ›› 2010, Vol. 30 ›› Issue (03) : 144-147.

壳聚糖纳米粒基因载体的制备和体外转染实验研究

  • 王红梅, 肖玉洁, 韩正祥, 高向阳, 裴冬生, 杜秀平
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摘要

目的制备基因载体壳聚糖纳米粒,研究其结构特征及其体外对细胞的转染活性。方法以复凝聚法制备壳聚糖-pDNA纳米粒;电镜测定其形态、粒径;凝胶电泳阻滞实验观察壳聚糖和pDNA的结合力;紫外可见分光光度计测定其负载力、负载率;体外转染入人胚肾细胞293T,荧光显微镜观察转染效率,CCK8法评价细胞毒性。结果壳聚糖-pGFP纳米粒多呈球形,直径为(132±48)nm;凝胶电泳阻滞实验示pGFP被完全包裹在纳米粒内;其负载力(LC)为(48.2±2.0)%,负载率(LE)为100%;体外转染实验证明壳聚糖-pGFP纳米粒能介导pGFP转染293T细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白;壳聚糖-pDNA抑制率(26.08±4.28)%。结论采用复凝聚法制备的壳聚糖-pDNA纳米粒可有效转染至细胞内,但有一定的细胞毒性。

关键词

壳聚糖 / 纳米粒 / 基因载体 / 转染

中图分类号

R318.08

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王红梅, 肖玉洁, 韩正祥, 高向阳, 裴冬生, 杜秀平. 壳聚糖纳米粒基因载体的制备和体外转染实验研究. 徐州医科大学学报. 2010, 30(03): 144-147

基金

江苏省高校自然科学基金(08KJD320007); 徐州医学院院长专项人才科研基金(07KJZ01)

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