目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定补骨脂酊中补骨脂素(psoralen)和异补骨脂素(isopsoralen)的含量。方法以Waters XTerra RP18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水(0.28∶0.52)为流动相,检测波长247nm。结果补骨脂素和异补骨脂素保留时间分别为14.326min和15.259min;补骨脂素的线性范围为0.88～14.08mg·L-1(r=0.9998);异补骨脂素的线性范围为0.80～12.80mg·L-1(r=0.9999)。补骨脂素的平均加样回收率为99.5%,RSD为1.10%;异补骨脂素的平均加样回收率为100.4%,RSD为0.59%。结论本方法简便、快速、准确,可用于补骨脂酊制剂的质量控制。