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  • 胡嘉怡, 杨屹城, 韦庄, 魏迎迎, 吴翠, 刘岩
    山西医科大学学报. 2024, 55(12): 1535-1542. https://doi.org/10.13753/j.issn.1007-6611.2024.12.007
    目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)对体外培养的人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法 体外分离培养hDPSCs,设置对照组(0 ng/mL IL-1β)和IL-1β组(0.1,1,10,100 ng/mL IL-1β);同理设置对照组(0 ng/mL IL-6)和IL-6组(0.1,1,10,100 ng/mL IL-6)。培养24,48,72 h时,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测hDPSCs增殖活性;培养7,14,21 d时,应用5-溴-4氯-3-吲哚-磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)碱性磷酸酯酶(ALP)显色试剂盒和茜素红(AR)显色试剂盒分别检测hDPSCs ALP染色、ALP活性、AR染色变化和钙结节定量。结果 CCK-8结果显示,不同浓度IL-1β组培养48 h细胞增殖活性均小于对照组(P<0.05),72 h时仅100 ng/mL IL-1β组增殖活性小于对照组(P<0.05)。成骨诱导第14,21天时,与对照组比较,1,10,100 ng/mL IL-1β组肉眼观ALP和AR染色变浅,ALP活性和钙结节OD450降低(P<0.05)。CCK-8结果显示,不同浓度IL-6组在48 h时细胞增殖活性均小于对照组(P<0.05),72 h时仅100 ng/mL IL-6组增殖活性小于对照组(P<0.05)。成骨诱导第21天,与对照组相比,肉眼观100 ng/mL IL-6组ALP染色较浅,ALP活性降低(P<0.05),0.1,1,10 ng/mL IL-6组在成骨诱导第7,14,21天,ALP染色、AR染色、ALP活性和钙结节OD450均无明显变化。结论 IL-1β和IL-6对hDPSCs增殖活性的影响均取决于其浓度和作用时间。高浓度的IL-1β抑制hDPSCs的成骨分化;IL-6对hDPSCs的成骨分化无明显影响。
  • 李庆, 田耘, 郭思扦, 史健
    山西医科大学学报. 2024, 55(12): 1569-1577. https://doi.org/10.13753/j.issn.1007-6611.2024.12.011
    目的 基于生物信息学分析和尿液蛋白质组学验证,寻找IgA肾病(IgAN)的差异表达基因。方法 从基因表达综合数据库(GEO)中下载芯片数据GSE73953,筛选差异表达基因(DEGs)。对筛选出的差异表达基因进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析,并通过String数据库构建蛋白互作网络(PPI),通过CytoScape软件进行展示。选取陕西省中医医院IgA肾病患者Lee氏Ⅱ级10例(IgAN-1组),Lee氏Ⅲ级10例(IgAN-2组),Lee氏Ⅳ级10例(IgAN-3组),微小病变患者(MCD组)5例,收集所有相关临床资料,通过定量蛋白质组学检测,获取了IgA肾病进展过程中差异表达基因在尿液中的表达数据。结果 共筛选出1 108个差异表达基因,其中表达上调237个,表达下调871个。GO富集分析结果显示,筛选出的差异表达基因主要集中于自噬、蛋白质结合、炎症反应调节、细胞周期等,KEGG富集分析主要包括了FOXO信号通路、C型凝集素受体信号通路、致病性大肠杆菌感染、内质网蛋白质加工等。通过PPI网络及5种算法,CD74、RPS13、EEF2、STAT3、RPL4被筛选为关键基因。IgAN-1组、IgAN-2组、IgAN-3组尿液中CD74表达量显著高于MCD组(P<0.05),IgAN组间CD74表达量差异无统计学意义(P>0.05)。RPS13在IgAN-3组的表达低于MCD组(P<0.05)。EEF2、STAT3、RPL4在各组间表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IgA肾病差异基因的表达多与机体免疫防御、细胞凋亡、氧化应激、能量代谢等相关,上述生物过程在IgA肾病的发生、发展中发挥重要作用。CD74在IgA肾病患者尿液中显著表达,可能成为未来IgA肾病诊断和治疗的靶点之一。