目的 探讨miR-320介导氧化应激反应参与糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）的机制。方法 采用H₂O₂诱导构建视网膜内皮细胞氧化应激模型，并利用miR-320敲低或过表达质粒以及NF-κB激活蛋白（NKAP）过表达质粒转染细胞。将视网膜内皮细胞（hRECs）分为H₂O₂（0,50,100,200μmol/L）组、agomir-NC组、agomir-320组、antagomir-NC组、antagomir-320组、PBS+agomir-NC组、PBS+agomir-320组、H₂O₂+agomir-NC组、H₂O₂+agomir-320组、agomir-NC+Vector组、agomir-NC+NKAP oe组、agomir-320+Vector组、agomir-320+NKAP oe组。CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，ELISA检测氧化应激相关指标过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平，qRT-PCR检测miR-320及NKAP的mRNA水平，Western blot检测炎症因子IL-1β、IL-6、IκBα、p-NF-κB、NF-κB和NKAP蛋白水平。荧光素酶报告基因实验（LUC）验证miR-320与NKAP靶向关系。结果 与0μmol/L H₂O₂相比，不同浓度H₂O₂处理均显著降低hRECs细胞活力、增加细胞凋亡率及细胞内ROS水平（P<0.05）。Western blot结果证实，H₂O₂呈浓度依赖性地诱导炎症相关蛋白IL-1β、IL-6的表达及NF-κB信号通路的激活（P<0.01）。为确保实验有效性，最终选择100μmol/L H₂O₂用于后续实验。成功构建miR-320低表达和高表达的hRECs。与PBS+agomir-NC组或H₂O₂+agomir-NC组相比，PBS+agomir-320组和H₂O₂+agomir-320组hRECs凋亡率，CAT、MDA、SOD水平，炎症因子和p-NF-κB水平均显著降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达显著上调（P<0.05）。LUC实验证实miR-320能够与NKAP靶向结合并下调NKAP的表达。与agomir-NC+Vector组或agomir-320+Vector组相比，agomir-NC+NKAP oe组或agomir-320+NKAP oe组hRECs细胞凋亡，CAT、MDA、SOD水平，炎症因子和p-NF-κB水平均显著上调（P<0.05）,IκBα蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论 miR-320能够与NKAP靶向结合，并通过下调NKAP的表达抑制细胞的氧化应激反应，进而缓解DR的进程。