人乳头瘤病毒16和18型的E6和E7蛋白多克隆抗体制备及鉴定

周艳, 张婷, 王志荣, 许雪梅

神经药理学报 ›› 2025, Vol. 15 ›› Issue (01) : 1-6+13.

人乳头瘤病毒16和18型的E6和E7蛋白多克隆抗体制备及鉴定

  • 周艳, 张婷, 王志荣, 许雪梅
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摘要

目的:预测人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型和18型的E6及E7蛋白的B细胞线性表位,制备兔抗HPV16和HPV18的E6和E7的多克隆抗体。方法:利用生物信息学软件分析HPV16和HPV18的E6和E7蛋白的氨基酸序列,预测B细胞线性表位,设计并人工合成HPV16 E6、HPV16 E7、HPV18 E6及HPV18 E7多肽,将合成肽分别与血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫新西兰大白兔,制备HPV16和HPV18的E6和E7多克隆抗体。以原核系统表达的重组蛋白Flic-HPV16 E6 E7、Flic-HPV18 E6 E7为检测抗原,采用间接ELISA法和Western blot法检测多克隆抗体的效价和特异性。结果:ELISA法检测所制备的HPV16 E6、HPV16 E7和HPV18 E7多克隆抗体的效价可达1:2.56×10~5,HPV18 E6多克隆抗体效价可达1:1.28×10~5。Western blot结果显示,所制备的抗体均能与相应的重组蛋白Flic-HPV16 E6E7和Flic-HPV18 E6E7特异性结合。结论:采用人工合成肽作为免疫原成功制备了高效价、特异性好的兔抗HPV16和HPV18的E6和E7蛋白多克隆抗体,为后续进行HPV感染检测、疫苗研发等实验研究创造了条件。

关键词

人乳头瘤病毒 / 多克隆抗体 / E6蛋白 / E7蛋白

中图分类号

R392

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周艳, 张婷, 王志荣, 许雪梅. 人乳头瘤病毒16和18型的E6和E7蛋白多克隆抗体制备及鉴定. 神经药理学报. 2025, 15(01): 1-6+13

基金

CAMS医学科学创新基金项目(No.2021-I2M-1-043); 河北北方学院省属高校基本科研业务费(No.JYT2022005)

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