目的：建立槲寄生超高效液相色谱（ultra performance liquid chromatography,UPLC）指纹图谱并进行相似度评价，结合聚类分析（cluster analysis,CA）和主成分分析（principal component analysis,PCA）化学计量学分析方法，为槲寄生药材质量一致性评价提供参考。方法：色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3 (2.1×100 mm,1.8μm)；流动相为乙腈（A）-0.5%乙酸水（B），梯度洗脱；检测波长254 nm；柱温30℃；进样量3μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012版）》建立槲寄生指纹图谱，标定其共有峰，并进行相似度评价；采用SPSS26.0对14批不同产地的槲寄生进行聚类分析和主成分分析。结果：槲寄生指纹图谱的方法学考察结果良好，确定了14个共有峰，通过与对照品比对，指认了其中4号峰为紫丁香苷、9号峰为高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。相似度评价结果显示，11批样品的相似度在0.950以上，其余3批相似度小于0.950；通过聚类分析将样品聚为3类，S5单独为一类，S12,S7,S9为一类，其余样品聚为一类；主成分分析得到的4个主成分因子的累计方差贡献率为88.732%，其中S5、S10、S3、S11样品的主成分因子在综合得分位于前四位，整体质量良好。结论：该研究所建立的指纹图谱方法分离度、精密度、稳定性良好，分析时间短，并且结合相似度评价、聚类分析和主成分分析，为槲寄生药材的质量控制提供理论基础。