[目的]本试验旨在从类固醇合成、凋亡、自噬以及p38MAPK/HSPB1通路蛋白表达方面研究槲皮素对湖羊睾丸间质细胞热暴露损伤的影响。[方法]将分离鉴定的湖羊睾丸间质细胞分为适温（NT）和热暴露（HT）组，分别加0（C）或10μmol·L^-1（Q）的槲皮素处理。用CCK8检测细胞活力，ELISA检测睾酮水平，Western blot检测睾酮合成、细胞凋亡与自噬相关蛋白以及p38MAPK/HSPB1通路成员的表达。[结果]槲皮素缓解了热暴露诱导的细胞活力下降（P<0.05）,但活力仍低于NT组（P<0.05）。内固醇合成方面：槲皮素缓解了热暴露诱导的睾酮水平和类固醇生成蛋白（CYP11A1、HSD3B和CYP17A1）表达水平的下降（P<0.05）,热暴露与槲皮素的交互作用对睾酮水平和HSD3B及CYP17A1表达水平影响显著（P<0.05）。细胞凋亡方面：槲皮素缓解了热暴露诱导的BCL-2表达水平的下降，导致BCL-2/BAX值显著增加（P<0.05）,同时使Cleaved Caspase3/Caspase3值显著下降（P<0.05）,并且热暴露与槲皮素交互作用显著（P<0.05）。细胞自噬方面：槲皮素使热暴露诱导的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值显著降低（P<0.05）,热暴露与槲皮素交互作用显著（P<0.05）。通路成员表达方面：槲皮素缓解了热暴露诱导的p-p38和p-HSPB1活化（P<0.05）,热暴露与槲皮素交互作用显著（P<0.05）。[结论]p38MAPK/HSPB1通路参与调节槲皮素缓解热暴露湖羊睾丸间质细胞凋亡与自噬，改善细胞活力与睾酮分泌状况。