2′-岩藻糖基乳糖缓解LPS诱导的细胞炎症应答和屏障损伤的功能研究

孙伟乐, 李轩, 慕春龙, 朱伟云

南京农业大学学报 ›› 2024, Vol. 47 ›› Issue (06) : 1130-1138.

2′-岩藻糖基乳糖缓解LPS诱导的细胞炎症应答和屏障损伤的功能研究

  • 孙伟乐, 李轩, 慕春龙, 朱伟云
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摘要

[目的]本文旨在探究2′-岩藻糖基乳糖(2′-FL)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪小肠上皮J2细胞系(IPEC-J2)炎症和屏障功能的影响。[方法]以IPEC-J2为细胞模型,先通过预试验对LPS和2′-FL的处理浓度分别进行筛选,最终选择100μg·mL-1 LPS诱导细胞促炎反应,然后通过不同浓度(20和100μg·mL-1)2′-FL干预来探究其对LPS诱导IPEC-J2的促炎反应和屏障功能受损的调节作用。试验分为6组:对照组(CON)、LPS组(100μg·mL-1 LPS)、FL20组(20μg·mL-1 2′-FL)、FL100组(100μg·mL-1 2′-FL)、SF20组(100μg·mL-1 LPS+20μg·mL-1 2′-FL)和SF100组(100μg·mL-1 LPS+100μg·mL-1 2′-FL)。试验处理24 h后测定各组细胞活力、紧密连接蛋白、炎症因子和炎症相关通路基因的表达水平,通过Western blot检测NF-κB、Myd88、Claudin-1和Occludin蛋白的相对表达水平。[结果]与CON组相比,LPS组显著降低IPEC-J2细胞活力(P<0.05),显著上调促炎因子IL-6、IL-8及炎症通路NF-κB、Myd88和CD14基因的表达(P<0.05),显著下调抗炎因子IL-4基因的表达(P<0.05),显著下调紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4、ZO-1、ZO-2和Occludin基因的表达(P<0.05)。与CON组相比,FL20组还显著提高Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4和ZO-2基因的表达水平(P<0.05)。与LPS组相比,SF20组和SF100组显著提高IPEC-J2细胞活力(P<0.05),显著下调IL-8及上调IL-4和IL-10基因的表达(P<0.05),显著下调NF-κB、Myd88和CD14基因的表达(P<0.05),显著上调Claudin-1、Claudin-3、Claudin-4、ZO-1、ZO-2、Occludin基因的表达(P<0.05)。Western blot结果显示,与CON组相比,只有LPS组的NF-κB蛋白显著上调(P<0.05)。与LPS组相比,SF20组的NF-κB、Myd88蛋白表达量降低,Claudin-1和Occludin蛋白表达量升高,但差异均不显著。[结论]LPS处理促进IPEC-J2细胞的促炎反应并造成屏障功能受损,2′-FL干预减弱了LPS刺激的促炎信号通路,改善了LPS引起的屏障功能受损。

关键词

2′-岩藻基乳糖 / 猪小肠上皮细胞 / 紧密连接蛋白 / 炎症因子

中图分类号

S828.5

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孙伟乐, 李轩, 慕春龙, 朱伟云. 2′-岩藻糖基乳糖缓解LPS诱导的细胞炎症应答和屏障损伤的功能研究. 南京农业大学学报. 2024, 47(06): 1130-1138

基金

国家自然科学基金项目(32030104); 国家重点研发计划项目(2022YFD1300402)

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