[目的]为实现香蕉枯萎病的有效防控，本研究拟构建对香蕉枯萎病具有抑制作用的生物防治菌群。[方法]利用平板对峙法从香蕉枯萎病的抑病型土壤中分离筛选对香蕉枯萎病菌(尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种)具有抑制作用的菌株，并通过16S rRNA测序技术对菌株进行鉴定，通过室内培养试验测定菌株产生长素和生物膜形成能力，结合室内共培养试验和盆栽试验探究构建的菌群对香蕉枯萎病的抑制作用。[结果]分离筛选到的4株拮抗菌均对香蕉枯萎病菌表现出较强的抑制作用，16S rRNA序列检测结果表明，其分别为芽胞杆菌(Bacillus sp.)、链霉菌(Streptomyces sp.)、芽胞杆菌(Bacillus sp.)、肠杆菌(Enterobacter sp.);室内培养试验发现，分离筛选的4株拮抗菌具有较强的产生长素和生物膜形成能力；体外共培养研究结果进一步发现，由4株菌组成的合成菌群表现出最强的抑制效果，相比于对照，抑菌率增加了93.6%;盆栽试验证实该合成菌群能有效在香蕉植株根际定殖，并显著降低病原菌数量，相比于对照，其病原菌数量降低了92.13%。[结论]成功分离筛选并构建了一个由4株细菌组成的抑病菌群，盆栽条件下其能明显抑制香蕉枯萎病病原菌的增殖，为利用有益微生物防控香蕉枯萎病提供了一定的技术支撑。