[目的]通过分析212株奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌分离株的耐药特性和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)产生情况，了解该类致病菌对新型抗生素的耐药现状，防范其对公共卫生安全产生的潜在威胁，为防控肺炎克雷伯菌引起的奶牛乳房炎提供参考。[方法]通过对分离株的细菌形态学观察、khe基因的PCR检测和16S rRNA序列测定筛选并鉴定肺炎克雷伯菌株，利用K-B琼脂平板扩散法和微量肉汤稀释法评估肺炎克雷伯分离株的耐药性。[结果]肺炎克雷伯菌耐药率由高到低依次为头孢吡肟(5.7%)、环丙沙星(4.7%)、头孢他啶(4.2%)、美罗培南(2.8%)、厄他培南(0.5%)、亚胺培南和替加环素(0%)。在对替加环素中度敏感菌株中均检测到ramR基因，但未发现tetX和ramA基因。在对喹诺酮类抗生素耐受菌株中，有2株检测到qnrA基因，6株检测到qnrB基因，23株检测到qnrS基因，未发现qnrD基因。在对β-内酰胺类抗生素耐受菌株中，SHV-1、SHV-11、SHV-34、SHV-76、SHV-171、TEM-1、CTX-M-3、CTX-M-14、CTX-M-15、CTX-M-27、CTX-M-55、CTX-M-244、ACT-6、ACT-31、DHA-1、CMY-174、CMY-81和LEN-5检出率分别是6.56%、9.84%、1.64%、3.28%、1.64%、27.87%、8.20%、1.64%、3.28%、1.64%、9.84%、4.92%、3.28%、1.64%、9.84%、1.64%、1.64%和1.64%,未检测到上述耐药基因的突变体。[结论]本试验分离的肺炎克雷伯菌对新型头孢类抗生素产生耐药性，部分菌株具有多重耐药性，甚至对碳青霉烯类抗生素产生耐药。该结果提示需防范新型抗生素耐药菌株的产生和传播，以免引发公共卫生安全危害，对防控肺炎克雷伯菌引起的奶牛乳房炎提出了新要求。