目的 研究中期因子（MDK）在胆管癌（CCA）中的表达及其对患者预后的预测价值，探索MDK可能影响CCA进展的机制。方法 从癌症基因组图谱（TCGA）数据库获取CCA样本数据信息，分析MDK在癌与癌旁组织中的表达差异及其与临床特征的相关性，使用基因表达综合数据库（GEO）和解放军总医院第五医学中心2018年6月—2021年9月经手术切除的11例CCA患者的临床资料进行相关验证。通过STRING和Cytoscape构建蛋白互作网络，使用基因本体（GO）和京都基因与基因组数据库（KEGG）进行富集分析，探讨MDK相关基因所参与的生物学过程和肿瘤相关通路。此外，应用TIMER和TISIDB数据库分析CCA肿瘤组织中MDK的表达与免疫细胞浸润的相关性。计量资料两组间比较采用成组t检验或MannWhitney U检验。计数资料组间比较采用Fisher精确概率法。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，并采用Log-rank检验进行组间比较。两变量间的相关性采用Spearman相关性分析。结果 比较TCGA数据库中CCA患者肿瘤组织及癌旁组织中MDK的表达水平，非配对分析结果和配对分析结果均显示，MDK在CCA肿瘤组织中的表达水平高于癌旁组织（P值均<0.001）；对纳入的11例CCA患者肿瘤组织及其配对癌旁组织标本进行转录组测序，结果显示，MDK在CCA肿瘤组织中的表达水平显著高于其配对癌旁组织（P<0.01）。MDK高表达与淋巴结转移（P=0.045）和血管侵犯（P=0.044）有关。生存分析显示，MDK高表达的CCA患者总生存期（χ2=5.30,P=0.028）及疾病特异性生存期（χ2=6.25,P=0.019）均明显短于MDK低表达的患者。GO和KEGG富集分析显示，MDK表达相关的30个基因与泛素介导的蛋白质水解过程密切相关，并影响CCA患者预后；TIMER分析结果显示，MDK表达与B淋巴细胞（r=0.356,P=0.035 6）和树突状细胞（r=0.409,P=0.014 7）在肿瘤组织微环境中的浸润呈正相关；TISIDB分析结果显示，MDK表达水平与CXCL16(r=0.465,P=0.004 67)呈正相关，与CXCL12(r=-0.389,P=0.019 7)及CXCR5(r=-0.393,P=0.018 5)呈负相关；与免疫检查点调节剂VTCN1(r=-0.393,P=0.018 3)、LTA(r=-0.380,P=0.022 7)和PVR(r=-0.350,P=0.037 3)呈负相关。结论 MDK高表达提示CCA患者预后不佳，MDK有潜力成为预测CCA患者预后的分子标志物，其可能通过调控泛素介导的蛋白质水解过程及调控B淋巴细胞和树突状细胞的浸润促进CCA的发生发展。