CEACAM1源性荧光多肽底物Site 84对MMP-2、-7、-9、-12酶活性检测的研究

万雯, 叶雨佳, 杨晓娜, 杨理宏, 王华炜, 董玲, 陈丽星, 孟照辉

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昆明医科大学学报 ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (02) : 9-16.

CEACAM1源性荧光多肽底物Site 84对MMP-2、-7、-9、-12酶活性检测的研究

  • 万雯, 叶雨佳, 杨晓娜, 杨理宏, 王华炜, 董玲, 陈丽星, 孟照辉
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摘要

目的 探索CEACAM1源性多肽合成的荧光底物Site 84对MMP-2,-7,-9,-12酶活性的检测,并进一步探索荧光多肽底物Site 84在区分同属于MMPs明胶酶谱中MMP-2和MMP-9的应用。方法 采用荧光酶学法观察荧光多肽底物Site 84对MMP-2,-7,-9,-12酶活性的检测;进一步观察底物Site 84对明胶酶谱中MMP-2和MMP-9酶活性的敏感性和特异性;获得底物Site 84与MMP-2的酶促反应的动力学参数Km、Kcat。结果 以Site 84为底物,获得MMP-12、-7、-2的酶活力曲线,但未获得MMP-9的酶活力曲线;此外,以Site 84为底物,可特异性检测明胶酶谱中MMP-2的酶活性,其可检测低浓度(0.6μM)MMP-2的酶活性,然而对高浓度(6μM)MMP-9未见明显酶促反应;最后,MMP-2和底物Site 84的酶促反应动力学参数:Km=315μM,Kcat/Km=2 565/MS。结论 以CEACAM1源性底物Site 84作为新型的荧光多肽底物,可获得MMP-12、-7、-2的酶活力曲线,且可特异性检测MMPs明胶酶谱中MMP-2的酶活性。

关键词

Site 84 / 荧光多肽底物 / 酶活性 / 明胶酶 / CEACAM1源性

中图分类号

O657.3

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万雯, 叶雨佳, 杨晓娜, 杨理宏, 王华炜, 董玲, 陈丽星, 孟照辉. CEACAM1源性荧光多肽底物Site 84对MMP-2、-7、-9、-12酶活性检测的研究. 昆明医科大学学报. 2025, 46(02): 9-16

基金

国家自然科学基金(82360077); 云南省基础研究计划昆医联合专项-面上项目(202201AY070001-082);云南省基础研究计划青年项目(202201AU070063); 昆明医科大学第一附属医院“535”高层次人才(2024535Q03)

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