肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制

陆慧, 李东升

锦州医科大学学报 ›› 2024, Vol. 45 ›› Issue (04) : 19-25. DOI: 10.13847/j.cnki.lnmu.2024.04.001

肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制

  • 陆慧, 李东升
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摘要

目的 研究在肝性脑病中发挥强效作用的促炎因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cell, HBMEC)中RH蛋白C(rhesus glycoprotein of C,RHCG)表达的调控和潜在的作用机制。方法 HBMEC复苏,传5代,以适宜浓度铺孔板在孵箱中培养,并通过与TNF-α(浓度为0.1μg/mL内皮细胞培养基ECM)的共培养,按照作用时间不同分组,运用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)及Western Blot,检测HBMEC中RhCG mRNA及蛋白随着TNF-α作用时间延长表达量的变化,并统计变化趋势。根据以上结果选择表达量最高的时间点加PKC抑制剂Safingol处理,分组:(1)TNF-α处理0 h组;(2)TNF-α处理24 h组;(3)Safingol单独处理组;(4)TNF-α+Safingol抑制剂组:预先用Safingol处理HBMEC细胞1 h后,再予TNF-α刺激24 h。应用Western Blot方法检测HBMEC中RhCG蛋白的表达水平,并统计RhCG蛋白不同组别的变化趋势。结果 RhCG蛋白随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24 h表达量最高。RhCG mRNA随着TNF-α作用时间的延长表达增加,24 h表达量最高。加入处理因素PKC-α特异性抑制剂Safingol后,RhCG蛋白的表达随之下降,差异有统计学意义。结论 肿瘤坏死因子TNF-α可以上调HBMEC细胞中RhCG mRNA及蛋白的表达。PKC-α参与TNF-α上调HBMEC中RhCG蛋白表达的调控。

关键词

肝性脑病 / 肿瘤坏死因子 / 人脑微血管内皮细胞 / 氨转运蛋白

中图分类号

R575.3

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陆慧, 李东升. 肿瘤坏死因子α上调脑血管内皮细胞RH蛋白C表达的机制. 锦州医科大学学报. 2024, 45(04): 19-25 https://doi.org/10.13847/j.cnki.lnmu.2024.04.001

基金

辽宁省教育厅重点项目,项目编号:LJKZ0816

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