麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征

高雨晴 , 董钢印 , 张洪瑞 , 马占山 , 方丽 , 詹冬玲

PDF(3721 KB)
PDF(3721 KB)
吉林大学学报(理学版) ›› 2024, Vol. 62 ›› Issue (03) : 742-749. DOI: 10.13413/j.cnki.jdxblxb.2023325

麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征

  • 高雨晴 , 董钢印 , 张洪瑞 , 马占山 , 方丽 , 詹冬玲
作者信息 +
History +

摘要

以大型真菌灵芝中的麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶(MGAM)为研究对象,采用同源序列比对、同源模建、底物对接和定点突变等方法成功构建酶活力显著降低的突变体D246A.酶学性质表征结果表明:最适反应温度由野生型(wild type, WT)的65℃减少至60℃,突变体耐热能力下降;最适pH值由WT的6.0升高至7.0,有利于工程菌生长;半衰期由WT的2.0 h下降至1.5 h,酶稳定性降低.酶动力学结果表明:突变体D246A酶动力学曲线符合Michaelis方程,与WT相比,K_m值变大,表明酶与底物亲和力下降;V_(max)约降低至原来的1/4.

关键词

定点突变 / 异源表达 / 性质表征 / 麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶

中图分类号

Q55

引用本文

导出引用
高雨晴 , 董钢印 , 张洪瑞 , 马占山 , 方丽 , 詹冬玲. 麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征. 吉林大学学报(理学版). 2024, 62(03): 742-749 https://doi.org/10.13413/j.cnki.jdxblxb.2023325

基金

吉林省自然科学基金(批准号:20230101262JC)

评论

PDF(3721 KB)

Accesses

Citation

Detail

段落导航
相关文章

/